[发明专利]一种减少生物样品背景荧光的方法有效

专利信息
申请号: 201410043251.8 申请日: 2014-01-29
公开(公告)号: CN103776679B 公开(公告)日: 2017-03-15
发明(设计)人: 龚辉;骆清铭;胡碧荷 申请(专利权)人: 华中科技大学
主分类号: G01N1/28 分类号: G01N1/28
代理公司: 北京华沛德权律师事务所11302 代理人: 刘杰
地址: 430074 湖北*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明公开了一种减少生物样品背景荧光的方法,属于生物工程技术领域。该方法采用苏丹黑B作为光吸收剂,利用高浓度乙醇溶液溶解苏丹黑B染色液使之能够快速均匀渗透到生物组织中。利用该方法所得生物样品背景荧光大大降低,提高了荧光成像的信号对比度。
搜索关键词: 一种 减少 生物 样品 背景 荧光 方法
【主权项】:
一种减少生物样品背景荧光的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将生物样品用冰水预冷却的质量百分比为4%的多聚甲醛溶液固定6~24h,固定液中加入2.5%蔗糖;(2)将步骤(1)得到的生物样品用冰水预冷却的浓度为0.01mol/L的PBS漂洗液清洗3~24h,其间更换新鲜漂洗液3~5次;(3)将步骤(2)得到的生物样品依次放入冰水预冷却的质量百分比为50%和70%的乙醇溶液中进行梯度脱水,每次15min~2h;(4)将步骤(3)得到的生物样品放入苏丹黑B染色液中染色30min~48h;所述苏丹黑B染色液是由质量百分比90~100%的乙醇溶解浓度为0.5~5w/w‰的苏丹黑B染色液制备得到;(5)将步骤(4)得到的生物样品用冰水预冷却的浓度为0.01mol/L的PBS漂洗液6~24h,其间更换新鲜漂洗液3~5次。
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