[发明专利]一种减少生物样品背景荧光的方法有效
| 申请号： | 201410043251.8 | 申请日： | 2014-01-29 |
| 公开（公告）号： | CN103776679B | 公开（公告）日： | 2017-03-15 |
| 发明（设计）人： | 龚辉;骆清铭;胡碧荷 | 申请（专利权）人： | 华中科技大学 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28 |
| 代理公司： | 北京华沛德权律师事务所11302 | 代理人： | 刘杰 |
| 地址： | 430074 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 减少 生物 样品 背景 荧光 方法 | ||
1.一种减少生物样品背景荧光的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将生物样品用冰水预冷却的质量百分比为4%的多聚甲醛溶液固定6～24h；
（2）将步骤（1）得到的生物样品用冰水预冷却的浓度为0.01mol/L的PBS漂洗液清洗3～24h，其间更换新鲜漂洗液3～5次；
（3）将步骤（2）得到的生物样品依次放入冰水预冷却的质量百分比为50%和70%的乙醇溶液中进行梯度脱水，每次15min～2h；
（4）将步骤（3）得到的生物样品放入苏丹黑B染色液中染色30min～48h；
（5）将步骤（4）得到的生物样品用冰水预冷却的浓度为0.01mol/L的PBS漂洗液6～24h，其间更换新鲜漂洗液3～5次。
2.根据权利要求1所述的减少生物样品背景荧光的方法，其特征在于，所述步骤（1）中生物样品的尺寸不超过2厘米见方。
3.根据权利要求1所述的减少生物样品背景荧光的方法，其特征在于，所述步骤（4）中苏丹黑B染色液是由质量百分比90～100%的乙醇溶解浓度为0.5～5w/w‰(g/kg)的苏丹黑B染色液制备得到。
4.根据权利要求3所述的减少生物样品背景荧光的方法，其特征在于，所述步骤（4）中苏丹黑B染色液染色时间根据生物样品的大小而定，1毫米厚度以内的组织块染色时间为30min～2h，1～5毫米厚度的组织块染色时间为1～12小时，5毫米～2厘米厚度的组织块染色时间为12～48h。
5.根据权利要求1至4任一项所述的减少生物样品背景荧光的方法，其特征在于，所述生物样品可以为任何发射荧光的动物组织。
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