[发明专利]一种丝素蛋白/干细胞复合微球及应用

摘要

本发明公开了一种丝素蛋白/干细胞复合微球及应用，所述丝素蛋白/干细胞复合微球按如下方法制备：将丝素蛋白微球混悬液和干细胞混悬液充分混匀，置于无菌培养皿中，于37℃，5%CO₂、100%饱和湿度的细胞培养箱中培养，间隔3天更换培养液，培养至丝素蛋白微球与干细胞复合形成细胞微球；本发明所述的利用ADSCs复合丝素蛋白微球构建尿道组织工程填充剂用于SUI大鼠的治疗，一方面通过丝素蛋白微球的注射对膀胱颈提供支持填充，产生即时的治疗效果；另一方面又通过复合于丝素蛋白微球上的ADSCs的移植，继发的细胞分化与增殖，促进局部肌肉和神经再生，改善尿道括约肌结构和功能缺陷，从而提高尿道括约肌的控尿能力，达到持久的治疗效果。

主权项

一种丝素蛋白/干细胞复合微球，其特征在于所述复合微球按如下方法制备：将丝素蛋白微球与水的悬浮液加入DMEM低糖培养液中制成丝素蛋白微球混悬液，再将干细胞与含体积终浓度10%胎牛血清、体积终浓度1%青霉素‑链霉素的DMEM低糖培养液混合制成干细胞混悬液，然后将丝素蛋白微球混悬液和干细胞混悬液充分混匀，置于无菌培养皿中，于37℃，5%CO₂、100%饱和湿度的细胞培养箱中培养，间隔3天更换含体积终浓度10%胎牛血清、体积终浓度1%青霉素‑链霉素DMEM低糖培养液，培养至丝素蛋白微球与干细胞复合形成细胞微球，吸去培养液，收集细胞微球，即获得所述丝素蛋白/干细胞复合微球；所述丝素蛋白微球与水的悬浮液是将粒径75～180μm的丝素蛋白微球与双蒸水配制成悬浮液，所述干细胞为脂肪源性干细胞、小鼠肌源性干细胞、人胚胎干细胞分化成的间充质干细胞或大鼠骨髓源性干细胞；所述干细胞种植密度为5×10³‑1×10⁵个/cm²，所述丝素蛋白微球种植密度为1‑8mg/cm²。