[发明专利]评价内体运输的测定

摘要

本发明提供了用于评价分子递送到真核细胞之中的效率的测定和相应试剂盒(基础测定)。本发明还提供了用于评价测试分子有关上述基础测定的抑制效应的测定和相应试剂盒。

主权项

评价测试分子的内体释放能力的测定，所述测定包括：i)使真核细胞与有待评价内体释放能力的测试分子接触，其中所述真核细胞包含细胞膜，其包括存在于所述细胞的细胞膜外表面上的结合位点；ii)使测试分子与所述真核细胞温育，并由此允许a)测试分子与存在于真核细胞上的结合位点结合并形成结合复合物，从而允许所述结合复合物通过内吞进入真核细胞；b)一个或多个内体在所述细胞之内形成，其中所述一个或多个内体含有测试分子；和c)所述测试分子通过穿越所述一个或多个内体的内体膜进入所述真核细胞的胞质；iii)除去未与存在于真核细胞上的结合位点结合的过量测试分子；iv)在预定时间段后，检测存在于所述一个或多个内体中的测试分子的量，或者检测存在于所述真核细胞的胞质中的测试分子的量；v)将步骤iv)中检测到的测试分子的量与对照值相比较，其中所述对照值代表在步骤iv)之前存在于所述一个或多个内体中的测试分子的量或存在于胞质中的测试分子的量；vi)通过确定存在于所述一个或多个内体之中的测试分子的量的相对变化，或者通过确定存在于所述真核细胞胞质中的测试分子的量的相对变化，计算测试分子的内体释放值。