[发明专利]脐带间充质干细胞体外培养和扩增方法有效
| 申请号： | 201310756504.1 | 申请日： | 2013-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN103695369A | 公开（公告）日： | 2014-04-02 |
| 发明（设计）人： | 章毅;陈亮;陆瑶 | 申请（专利权）人： | 章毅;中国干细胞集团上海生物科技有限公司;重庆市干细胞技术有限公司;陕西省干细胞技术有限公司;苏州市干细胞技术有限公司;上海市干细胞技术有限公司;三亚市干细胞技术有限公司;中国干细胞集团上海有限公司;中国干细胞集团重庆有限公司;中国干细胞集团陕西有限公司;中国干细胞集团三亚有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 上海序伦律师事务所 31276 | 代理人： | 包文超 |
| 地址： | 200051 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种脐带间充质干细胞体外培养和扩增方法，包括脐带清洗、破碎消化、流式细胞仪分选和扩增培养等步骤。本发明提供的脐带间充质干细胞体外培养和扩增方法，特别筛选并获得CD271+细胞，配合使用10v/v%自体血清并加入50ng/mlHSP90培养6天后获得。验证发现，由此培养出的细胞不但具有常规间充质干细胞的表面标志，而且细胞增殖能力也强于常规方法培养出的间充质干细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 脐带 间充质 干细胞 体外 培养 扩增 方法 | ||
【主权项】：
一种脐带间充质干细胞体外培养和扩增方法，其步骤如下：先将清洗液清洗脐带并破碎，然后加入等体积的0.05w/v%胶原酶于37℃消化后，清洗3次以上，而得脐带间充质细胞。用不含血清的α‑MEM培养基重悬细胞，加入经纯化的CD271一抗，避光孵育，之后用磷酸缓冲液清洗，继续用不含血清的α‑MEM培养基重悬细胞，加入二抗并孵育，再次用磷酸缓冲液液洗，并用不含血清的α‑MEM培养基重悬细胞，以流式细胞仪无菌分选。将所得到CD271+亚群细胞接种，加入浓度10v/v%的自体脐带血血清，于37℃、5%CO2扩增培养6天。
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