[发明专利]一种检测和鉴定沙门氏菌1,4,[5],12:i:-的方法有效
申请号: | 201310700325.6 | 申请日: | 2013-12-18 |
公开(公告)号: | CN103725780A | 公开(公告)日: | 2014-04-16 |
发明(设计)人: | 杨小鹃;吴清平;张菊梅 | 申请(专利权)人: | 广东省微生物研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/10 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 刘明星 |
地址: | 510070 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种检测和鉴定沙门氏菌1,4,[5],12:i:-的方法。它对待检的沙门氏菌菌株进行O和H抗血清凝集反应,鉴定出菌株完整的O抗原,并且当遇到第Ⅱ相H抗原为阴性时,采用第Ⅰ相H抗原“Hi”进行鞭毛诱导实验,如果诱导实验结果显示第Ⅱ相H抗原为阴性时,确定为疑似菌株;提取疑似菌株的DNA,采用引物一、二和三进行多重PCR反应,如果多重PCR反应产物中同时出现1389bp、1000bp、261bp条带,则证明菌株是鼠伤寒沙门氏菌,如果多重PCR反应产物中只含有1000bp、261bp条带或仅出现261bp条带,则确认疑似菌株为沙门氏菌1,4,[5],12:i:-,出现其它的带型组合则是其它沙门氏菌。本方法操作简单,成本低廉,反应快速,高效,准确,无环境污染,是食品常规检测或疾病暴发检测的重要快速检测工具。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 鉴定 沙门氏菌 12 方法 | ||
【主权项】:
1.一种非疾病的诊断和治疗目的的检测和鉴定沙门氏菌1,4,[5],12:i:-的方法,其特征在于,包括以下步骤:a、血清分型初步确定单相菌抗原式:对待检的沙门氏菌菌株进行O和H抗血清凝集反应,鉴定出菌株完整的O抗原,并且当遇到第Ⅱ相H抗原为阴性时,采用第Ⅰ相H抗原“Hi”进行鞭毛诱导实验,如果诱导实验结果显示第Ⅱ相H抗原为阴性时,确定为疑似菌株;b、提取疑似菌株的DNA,采用下述表中的引物一、二和三进行多重PCR反应,如果多重PCR反应产物中同时出现1389bp、1000bp、261bp条带,则证明菌株是鼠伤寒沙门氏菌,如果多重PCR反应产物中只含有1000bp、261bp条带或仅出现261bp条带,则确认疑似菌株为沙门氏菌1,4,[5],12:i:-,出现其它的带型组合则是其它沙门氏菌;![]()
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