[发明专利]一种生产紫色杆菌素的工程菌及其应用有效
申请号: | 201310656314.2 | 申请日: | 2013-12-06 |
公开(公告)号: | CN104694448B | 公开(公告)日: | 2018-08-03 |
发明(设计)人: | 邢新会;方明月;张翀 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12P17/16;C12R1/19 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100084 北京市海淀区北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种生产紫色杆菌素的工程菌及其应用。本发明提供的工程菌,是将大肠杆菌进行如下(a)和(b)和(c)的改造得到的重组菌:(a)沉默抑制色氨酸生成的蛋白的编码基因;(b)导入参与色氨酸生成的蛋白的编码基因;(c)导入参与紫色杆菌素途径的各个蛋白的编码基因,所述紫色杆菌素途径为以色氨酸为底物生成紫色杆菌素的途径。本发明解决了紫色杆菌素发酵过程需要添加色氨酸的问题,以葡萄糖作为主要碳源生产紫色杆菌素,大幅降低了发酵制备紫色杆菌素的成本。 | ||
搜索关键词: | 紫色杆菌 编码基因 工程菌 色氨酸 蛋白 大肠杆菌 葡萄糖 发酵过程 添加色 重组菌 底物 生产 制备 发酵 应用 改造 | ||
【主权项】:
1.一种工程菌,是将大肠杆菌Bl21(DE3)进行如下(a)和(b)和(c)的改造得到的重组菌:(a)沉默抑制色氨酸生成的蛋白的编码基因;(b)导入参与色氨酸生成的蛋白的编码基因;(c)导入参与紫色杆菌素途径的各个蛋白的编码基因,所述紫色杆菌素途径为以色氨酸为底物生成紫色杆菌素的途径;所述参与色氨酸生成的蛋白为trpE蛋白和trpD蛋白;所述trpE蛋白如序列表的序列9所示;所述trpD蛋白如序列表的序列10所示;所述参与紫色杆菌素途径的各个蛋白为vioa蛋白、viob蛋白、vioc蛋白、viod蛋白和vioe蛋白;所述vioa蛋白如序列表的序列11所示;所述viob蛋白如序列表的序列12所示;所述vioc蛋白如序列表的序列13所示;所述viod蛋白如序列表的序列14所示;所述vioe蛋白如序列表的序列15所示;所述沉默抑制色氨酸生成的蛋白的编码基因的方法为:用序列表的序列3所示的双链DNA分子取代大肠杆菌BL21(DE3)中序列表的序列4所示的双链DNA分子。
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