[发明专利]一种生产紫色杆菌素的工程菌及其应用有效
| 申请号： | 201310656314.2 | 申请日： | 2013-12-06 |
| 公开（公告）号： | CN104694448B | 公开（公告）日： | 2018-08-03 |
| 发明（设计）人： | 邢新会;方明月;张翀 | 申请（专利权）人： | 清华大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P17/16;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100084 北京市海淀区北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 紫色杆菌 编码基因 工程菌 色氨酸 蛋白 大肠杆菌 葡萄糖 发酵过程 添加色 重组菌 底物 生产 制备 发酵 应用 改造 | ||
1.一种工程菌，是将大肠杆菌Bl21(DE3)进行如下(a)和(b)和(c)的改造得到的重组菌：(a)沉默抑制色氨酸生成的蛋白的编码基因；(b)导入参与色氨酸生成的蛋白的编码基因；(c)导入参与紫色杆菌素途径的各个蛋白的编码基因，所述紫色杆菌素途径为以色氨酸为底物生成紫色杆菌素的途径；
所述参与色氨酸生成的蛋白为trpE蛋白和trpD蛋白；所述trpE蛋白如序列表的序列9所示；所述trpD蛋白如序列表的序列10所示；
所述参与紫色杆菌素途径的各个蛋白为vioa蛋白、viob蛋白、vioc蛋白、viod蛋白和vioe蛋白；所述vioa蛋白如序列表的序列11所示；所述viob蛋白如序列表的序列12所示；所述vioc蛋白如序列表的序列13所示；所述viod蛋白如序列表的序列14所示；所述vioe蛋白如序列表的序列15所示；
所述沉默抑制色氨酸生成的蛋白的编码基因的方法为：用序列表的序列3所示的双链DNA分子取代大肠杆菌BL21(DE3)中序列表的序列4所示的双链DNA分子。
2.如权利要求1所述的工程菌，其特征在于：所述trpE蛋白的编码基因如序列表的序列1自5’末端第1-1563位核苷酸所示，所述trpD蛋白的编码基因如序列表的序列1自5’末端第1563-3158位核苷酸所示。
3.如权利要求1所述的工程菌，其特征在于：所述参与色氨酸生成的蛋白的编码基因如序列表的序列1所示。
4.如权利要求1所述的工程菌，其特征在于：所述vioa蛋白的编码基因如序列表的序列2自5’末端第1-1308位核苷酸所示，所述viob蛋白的编码基因如序列表的序列2自5’末端第1305-4322位核苷酸所示，所述vioc蛋白的编码基因如序列表的序列2自5’末端第4323-5612位核苷酸所示，所述viod蛋白的编码基因如序列表的序列2自5’末端第5612-6730位核苷酸所示，所述vioe蛋白的编码基因如序列表的序列2自5’末端第6740-7315位核苷酸所示。
5.如权利要求1所述的工程菌，其特征在于：所述参与紫色杆菌素途径的各个蛋白的编码基因如序列表的序列2所示。
6.权利要求1至5中任一所述的工程菌在生产紫色杆菌素中的应用。
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