[发明专利]一种结合荧光定量PCR技术的焦磷酸测序方法在审
| 申请号： | 201310627109.3 | 申请日： | 2013-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN103602748A | 公开（公告）日： | 2014-02-26 |
| 发明（设计）人： | 王彤;赵洪斌;陈大方 | 申请（专利权）人： | 瑞希基因科技（北京）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人： | 陈月福 |
| 地址： | 100029 北京市朝*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种结合荧光定量PCR技术的焦磷酸测序方法，本方法包括：荧光定量PCR、制备PCR产物单链模板、测序反应及检测共3个步骤。本方法采用荧光定量PCR代替传统的普通PCR加电泳的模式对靶标进行扩增和扩增效果检测，既缩短了检测时间，又降低了假阳性的风险，非常适用于临床检测等医疗领域。同时，根据荧光定量PCR结果，易于精确判断测序模板量，指导后续的基因测序，提高了检测的灵敏度和基因测序的效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 结合 荧光 定量 pcr 技术 磷酸 方法 | ||
【主权项】：
一种结合荧光定量PCR技术的焦磷酸测序方法，其特征在于，包括：1）荧光定量PCR：使用特异性的引物和带荧光标记的探针，对靶标所在核酸片段进行扩增，并通过实时荧光定量PCR仪予以实时检测，最后获得靶标的定量结果和PCR产物；2）制备PCR产物单链模板：将PCR产物固定于链霉亲和素琼脂糖HP珠子上，并制备成单链状态；3）测序反应及检测：使用特异性的测序引物，在预先设置好的焦磷酸测序仪上，对PCR产物的单链模板进行测序反应，并实时检测测序结果。
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