[发明专利]食用植物油中转基因成分NOS的恒温检测方法和检测试剂盒无效
| 申请号： | 201310603898.7 | 申请日： | 2013-11-25 |
| 公开（公告）号： | CN103642796A | 公开（公告）日： | 2014-03-19 |
| 发明（设计）人： | 谭贵良;李向丽;刘垚;袁秀金;陈亚波 | 申请（专利权）人： | 谭贵良 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 郑莹 |
| 地址： | 528403 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速检测食用植物油中NOS终止子的方法和试剂盒。该方法可稳定从植物油中提取核酸成分，并采用LAMP恒温扩增的方法在短时间内实现对转基因成分的检测，所述方法包括如下步骤：1）提取待检植物油样品的基因组DNA；2）待检样品DNA在BstDNA聚合酶存在的条件下进行恒温扩增反应；3）根据扩增结果判断待检样品中是否存在NOS终止子成分。本方法具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、鉴定简便、适合现场检测等特点，能快速检测植物油中的转基因成分NOS终止子。 | ||
| 搜索关键词： | 食用植物油 中转 基因 成分 nos 恒温 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种提取植物油基因组DNA的方法，包括如下步骤：1）取一定样品油，加入1～3倍体积的正己烷和0.1～0.3倍体积的TE，20～25℃环境条件下，混合均匀；2）静置分层后，去除上层油相；3）将下层的TE水相转移到离心管；依次加入1～2 µg鲑鱼精DNA，0.5～0.7倍体积预冷的异丙醇，0.1～0.2倍体积的3 mol/L的乙酸钠；轻轻来回颠倒混匀后置于‑20℃以下沉淀DNA；4）沉淀过夜后离心，弃上清液，用预冷的65～75%的乙醇洗涤沉淀，转移到离心管，离心；5）空干DNA，加入TE溶解DNA，置于－20℃以下保存。
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