[发明专利]原油环境样品中石油微生物的DNA提取方法有效
| 申请号： | 201310580492.1 | 申请日： | 2013-11-19 |
| 公开（公告）号： | CN103667255A | 公开（公告）日： | 2014-03-26 |
| 发明（设计）人： | 聂春梅;魏利;陈爱华;方新湘;赵燕;帕提古丽 | 申请（专利权）人： | 克拉玛依市金山石油化工有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 乌鲁木齐合纵专利商标事务所 65105 | 代理人： | 汤建武;周星莹 |
| 地址： | 834000 新疆维吾尔自治*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | 本发明涉及原油中提取DNA技术领域，是一种原油环境样品中石油微生物的DNA提取方法；按下述方法进行：第一步，在离心管中加入10微升至50微升原油，然后在盛有原油的离心管中加入100微升清洗缓冲液混合均匀得到混合液。本发明提取的DNA浓度较细菌DNA提取试剂盒提取的DNA浓度提高了50%，本发明提取的DNA的亮度明显高于细菌DNA提取试剂盒获得的DNA的亮度、获得的DNA的条带清晰、提取的DNA没有拖尾，说明本发明较细菌DNA提取试剂盒更易从原油中提取DNA，提取效率更高，更能准确全面真实的反映原油中微生物的种类和数量。 | ||
| 搜索关键词： | 原油 环境 样品 石油 微生物 dna 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种原油环境样品中石油微生物的DNA提取方法，其特征在于按下述方法进行：第一步，在离心管中加入10微升至50微升原油，然后在盛有原油的离心管中加入100微升清洗缓冲液混合均匀得到混合液；第二步，将盛有混合液的离心管放置在细胞破碎仪中破碎40秒至60秒，然后在转速为12000转/分钟至16000转/分钟的离心机中离心10分钟至15分钟，去除上清液得到固相；第三步，在固相中加入200微升至300微升萃取清洗液，然后加入30微升至50微升的溶菌酶并混合均匀，在温度为37℃下水浴5小时至10小时；第四步，对水浴后的溶液用细菌DNA提取试剂盒进行提取，得到原油环境样品中石油微生物的DNA。
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