[发明专利]用鲟鱼脊骨制备低分子量鲟鱼硫酸软骨素的方法

摘要

本发明涉及一种用鲟鱼脊骨制备低分子量鲟鱼硫酸软骨素的方法，将鲟鱼脊骨烫浸，剔除软骨上少量残留物，切块、水洗、干燥、粉碎、过筛；加NaOH在温水浴中提取鲟鱼硫酸软骨素提取液；调pH加胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合酶酶解、灭酶，调pH，用活性炭脱色，过滤；加入80%-95%乙醇，干燥、粉碎；用草酸降解，通过剂量为5-15kGy钴60γ射线辐照，调pH，加入乙醇，取沉淀，干燥，用行星式齿轮球磨机球磨，得分子量范围在5000至20000道尔顿低分子量鲟鱼硫酸软骨素产品。本发明采用辐照降解结合超微粉碎技术，可以降低硫酸软骨素的分子量，提高硫酸软骨素的生物利用率，且物理方法简便易行，处理过程无污染，生产成本低、产品纯度高，适合工业化大生产。

主权项

用鲟鱼脊骨制备低分子量鲟鱼硫酸软骨素的方法，其特征在于，具体步骤如下：（1）制备鲟鱼脊骨颗粒：将鲟鱼脊骨投入60℃‑100℃水中烫浸5‑20分钟，取出，剔除软骨上少量残留的肌肉、脂肪和其他结缔组织，切成2‑5cm长度小块，水洗两次，50℃‑80℃干燥4‑8h，粉碎，过20目的筛；（2）提取鲟鱼硫酸软骨素：将步骤（1）得到的鲟鱼脊骨颗粒加5‑10倍量5%‑10%的NaOH，于30‑60℃的水浴中搅拌提取3‑6h，得鲟鱼硫酸软骨素提取液；（3）鲟鱼硫酸软骨素的酶解：将步骤（2）得到的鲟鱼硫酸软骨素提取液调pH至7‑9，加胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合酶1.5%‑5%，40℃‑60℃保温水解3‑6h，取出于80℃‑100℃热水中灭酶；胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合质量比1：1；（4）脱色工艺：将步骤（3）灭酶的溶液调pH至6‑8，加溶液体积10%‑20%的活性炭于50℃‑80℃水浴脱色，过滤；（5）将步骤（4）所得滤液调pH至5‑7，边搅拌边加入80%‑95%乙醇至醇沉体系的乙醇浓度为50%‑80%，室温静置过夜，取沉淀无水乙醇脱水两次，50℃‑80℃控温干燥2‑5h，粉碎；（6）低分子量鲟鱼硫酸软骨素的制备工艺：将步骤（5）得到的硫酸软骨素配成5%‑15%溶液，加入草酸使体系草酸浓度控制在5%‑15%，降解时间1‑2小时，反应温度50‑70℃，然后通过钴60γ射线辐照，调pH至5‑7，边搅拌边加入80%‑95%乙醇至醇沉体系的乙醇浓度为50%‑80%，室温静置过夜，取沉淀，于50℃‑80℃干燥2‑5h，利用行星式齿轮球磨机，球磨5～15h，得低分子量鲟鱼硫酸软骨素产品；钴60γ射线辐照剂量为5‑15kGy。