[发明专利]一种对大肠杆菌进行转化的方法无效
申请号: | 201310525823.1 | 申请日: | 2013-10-31 |
公开(公告)号: | CN103602701A | 公开(公告)日: | 2014-02-26 |
发明(设计)人: | 徐丽 | 申请(专利权)人: | 徐丽 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12R1/19 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 116000 *** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开了一种对大肠杆菌进行转化的方法。步骤如下:首先去需要进行转化的大肠杆菌的感受态细胞,其之前需要冷藏在温度不高于零下70度的冰箱中,且时间不少于24小时;去除后将其在冰上融化;然后将DNA连接物加入细胞中,混合均匀后放置在温度为零下2-零下4摄氏度的冰箱中至少十分钟;其后进行双酶切;复苏后将带有转化子细胞的菌液离心分离;用移液器进行重悬;至于烤箱中培养10小时即可,复苏钱需要将其放在35摄氏度的环境下进行预热于,双酶切的时候,回收片段需要提取质粒。本发明的有益效果是,成本低,对环境污染小,可以作为大量制备GK8的途径。 | ||
搜索关键词: | 一种 大肠杆菌 进行 转化 方法 | ||
【主权项】:
一种对大肠杆菌进行转化的方法,其特征在于,步骤如下:首先去需要进行转化的大肠杆菌的感受态细胞,其之前需要冷藏在温度不高于零下70度的冰箱中,且时间不少于24小时;去除后将其在冰上融化;然后将DNA连接物加入细胞中,混合均匀后放置在温度为零下2-零下4摄氏度的冰箱中至少十分钟;其后进行双酶切;复苏后将带有转化子细胞的菌液离心分离;用移液器进行重悬;至于烤箱中培养10小时即可。
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