[发明专利]无需PCR仪的侧翼核酸序列快速准确扩增方法及应用有效
| 申请号： | 201310412687.5 | 申请日： | 2013-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN103421777A | 公开（公告）日： | 2013-12-04 |
| 发明（设计）人： | 胡广隆;程丽莉;黄武刚 | 申请（专利权）人： | 北京市农林科学院林业果树研究所 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 100093 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种无需PCR仪的侧翼核酸序列快速准确扩增方法，包括如下步骤：1）第一轮反应：以DNA模板、重组酶聚合酶、第一轮引物进行第一轮反应；2）第二轮反应：以第一轮反应产物为模板，加入重组酶聚合酶、第二轮引物，进行第二轮反应；3）第三轮反应：以第二轮反应产物为模板，加入重组酶聚合酶、第三轮引物进行第三轮反应。本发明还提供了用于无需PCR仪的侧翼核酸序列快速准确扩增方法的引物和试剂盒。本发明的另一目的是提供所述方法、引物、试剂盒在DNA序列扩增中的应用。本发明的方法不用PCR仪，能简单、高效、准确扩增DNA侧翼序列。 | ||
| 搜索关键词： | 无需 pcr 侧翼 核酸 序列 快速 准确 扩增 方法 应用 | ||
【主权项】：
用于无需PCR仪的侧翼核酸序列快速准确扩增方法的引物，其为：RPA‑nest1c：tcacagaagtatgccaagcgaggiiiiicggtc（如SEQ ID No.1所示）；RPA‑nest1a：tcacagaagtatgccaagcgaggiiiiiaggtc（如SEQ ID No.2所示）；RPA‑nest1t：tcacagaagtatgccaagcgaggiiiiitggtc（如SEQ ID No.3所示）；RPA‑nest1g：tcacagaagtatgccaagcgaggiiiiigggtc（如SEQ ID No.4所示）；RPA‑nest2：tcacagaagtatgccaagcg（如SEQ ID No.5所示）；RPA‑nest3：cagaagtatgccaagcgagg（如SEQ ID No.6所示）。
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