[发明专利]一种牛睾丸细胞系及其建立方法和应用有效
| 申请号： | 201310285025.6 | 申请日： | 2013-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN103849602A | 公开（公告）日： | 2014-06-11 |
| 发明（设计）人： | 王文秀;沈志强;管宇;魏凤 | 申请（专利权）人： | 山东省滨州畜牧兽医研究院 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人： | 谢殿武 |
| 地址： | 256600 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种牛睾丸细胞系。本发明还提供了该细胞系的建立方法，主要步骤为：(1)原代培养：无菌获取初生犊牛睾丸，清除粘附组织，采用胰酶消化法分离获得高活力的牛睾丸细胞；将分离得到的高活力的牛睾丸细胞培养于DMEM培养基中，置于37℃，5％CO2条件下培养，得原代牛睾丸细胞；(2)转染和筛选：提取纯化含有hTERT基因的真核表达质粒pCI-neo-hTERT，采用脂质体转染法，将提取纯化的的真核表达质粒pCI-neo-hTERT导入步骤(1)原代培养的牛睾丸细胞进行转染；(3)筛选和扩大培养。本发明牛睾丸细胞易于培养，生长速度较快，能稳定传代，细胞活率高、纯度高且能很好保藏；本发明方法操作简便，便于推广应用。本细胞系可应用于生产猪瘟疫苗、羊痘、羊口疮疫苗等。 | ||
| 搜索关键词： | 种牛 睾丸 细胞系 及其 建立 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种牛睾丸细胞系，其保藏号为：CCTCC C201399。
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