[发明专利]利用防腐剂提高农杆菌介导的小麦转化存活率的方法有效
申请号: | 201310242445.6 | 申请日: | 2013-06-19 |
公开(公告)号: | CN103276014A | 公开(公告)日: | 2013-09-04 |
发明(设计)人: | 冉冬;夏勉;张斌;何峰;郑辰 | 申请(专利权)人: | 北京未名凯拓作物设计中心有限公司 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;A01H5/00 |
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地址: | 100085 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种新的纵切幼苗叶基座转化小麦的方法,在运用纵切幼苗叶基座进行农杆菌转化时,在共培养基质中添加防腐剂,从而遏制霉菌的生长,提高了转化植株的存活率。 | ||
搜索关键词: | 利用 防腐剂 提高 杆菌 小麦 转化 存活率 方法 | ||
【主权项】:
一种新的纵切幼苗叶基座转化小麦的方法,包括以下步骤:(a)清洗浸泡小麦种子使之吸水饱和发苗,培养至幼苗胚轴至长1cm;(b)将含有目的基因的农杆菌用含有AS、KT、2,4‑D、DTT、Silwet‑L77的基本液体培养基悬浮;(c)用手术刀蘸取转化液致伤小麦幼苗叶基座;(d)致伤后的小麦幼苗浸没在转化液中,28℃、24小时黑暗条件下,150rpm培养20min;(e)将转化后的小麦幼苗自然荫干后埋入含有防腐剂的共培养基质中,25℃,24小时黑暗条件下培养3d,然后定植到大棚中培养。
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