[发明专利]重组大肠杆菌高效表达L-天冬酰胺酶Ⅱ的方法有效
| 申请号： | 201310196806.8 | 申请日： | 2013-05-23 |
| 公开（公告）号： | CN103436513A | 公开（公告）日： | 2013-12-11 |
| 发明（设计）人： | 徐东;颜林春 | 申请（专利权）人： | 深圳市亚太兴实业有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/82 | 分类号： | C12N9/82;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 深圳中一专利商标事务所 44237 | 代理人： | 张全文 |
| 地址： | 518103 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种重组大肠杆菌高效表达L-天冬酰胺酶Ⅱ的方法以及一种L-天冬酰胺酶Ⅱ。重组大肠杆菌高效表达L-天冬酰胺酶Ⅱ的方法包括的步骤有：获得表达L-天冬酰胺酶Ⅱ的重组大肠杆菌；培养种子液；发酵培养；获得L-天冬酰胺酶Ⅱ；其中发酵培养的步骤采取分步发酵培养。本发明重组大肠杆菌高效表达L-天冬酰胺酶Ⅱ的方法工艺简单、易于操作，并且产出量高、降低了生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 大肠杆菌 高效 表达 天冬 酰胺酶 方法 | ||
【主权项】：
一种重组大肠杆菌高效表达L‑天冬酰胺酶Ⅱ的方法，包括如下步骤：获得表达L‑天冬酰胺酶Ⅱ的重组大肠杆菌；将所述重组大肠杆菌接入培养基一中进行摇床培养，得到种子液；将所述种子液按总接种量的5%～12%接入培养基二中进行分阶段发酵培养；其中，所述分阶段发酵培养是先在0～7小时内通入无菌空气，搅拌,进行第一阶段培养；在8～32小时内通入无菌空气，搅拌，且温度以0.3～1℃/h梯级降低至32℃进行第二阶段培养；在上述分阶段发酵培养过程中还添加有乳糖诱导剂，所述乳糖诱导剂在所述培养基二中的浓度为3～5g/L。
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