[发明专利]台湾稻螟对有机磷农药靶标抗性突变检测方法无效
| 申请号： | 201310191148.3 | 申请日： | 2013-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN103224993A | 公开（公告）日： | 2013-07-31 |
| 发明（设计）人： | 罗光华;李晓欢;方继朝;张志春;刘宝生;张谷丰;郭慧芳 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210014 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及台湾稻螟对有机磷农药靶标抗性突变的分子生物学检测方法，属于生物技术领域。以个体基因组DNA为模板，用特异性引物F：5’-AGGTGGCTTTTACTCTGGGA-3’和R：5’-AATGAATGCGGACAGTGAAC-3’进行PCR扩增，扩增产物用限制性内切酶MspA1 I进行酶切消化，然后进行琼脂糖凝胶电泳检测。如果有两条电泳条带(248bp和172bp)，说明该个体是敏感纯合子(SS)；如果只有一条电泳条带(420bp)，说明该个体是抗性纯合子(RR)；如果有三条电泳条带(420bp、248bp和172bp)，说明该个体是抗性杂合子(RS)。该检测方法周期短、灵敏度高、稳定性高，专用于台湾稻螟对有机磷农药靶标抗性突变的分子生物学检测。 | ||
| 搜索关键词： | 台湾 有机磷 农药 靶标 抗性 突变 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种利用分子生物学手段检测台湾稻螟对有机磷农药靶标抗性突变的方法，其特征是：在台湾稻螟的乙酰胆碱酯酶1基因(ace1)上发现一个对有机磷农药产生抗性的点突变，为了了解台湾稻螟田间种群中是否存在该抗性突变位点，随机采集一定数量的台湾稻螟个体，分别提取这些个体的基因组DNA做为PCR的模板，利用所设计的特异引物进行PCR扩增，扩增产物再用利用限制性核酸内切酶进行酶切消化，最后将酶切产物用琼脂糖凝胶进行电泳检测，根据电泳条带准确鉴定待检测样本的ace1基因上是否存在该抗性突变。
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