[发明专利]一种高效表达Alpha-苦瓜素蛋白的基因工程菌及构建方法和应用无效
申请号: | 201310183334.2 | 申请日: | 2013-05-17 |
公开(公告)号: | CN103255096A | 公开(公告)日: | 2013-08-21 |
发明(设计)人: | 丁毅;王书珍 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12P21/02;C07K14/415;C07K1/22;A01N47/44;A01P1/00;A01P3/00;C12R1/19 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430072*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种高效表达Alpha-苦瓜素蛋白的基因工程菌及构建方法和应用,通过将重组质粒pET-28a-αMC转化到Escherichiacoli的Rosetta(DE3)pLys,可得到一种重组菌株,CCTCC NO.M2013174。该菌株耐Kanamycin和Chloromycetin,在LB液体培养基中生长良好,可以在低浓度IPTG诱导剂诱导的条件下大量合成活性蛋白并积累在细胞质中。本发明的重复性好,可操作性强,价格低廉,因此适合Alpha-苦瓜素蛋白的工业化生产和应用。本工程菌株所表达的Alpha-苦瓜素的产量为115mg/L,经下游纯化后得率为85mg/L,纯度为94.7%,回收率为73.9%。 | ||
搜索关键词: | 一种 高效 表达 alpha 苦瓜 蛋白 基因工程 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种基因工程菌,其特征在于:大肠杆菌Escherichia coli Rosetta (DE3) / pET‑28a‑αMC,CCTCC NO.M2013174。
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