[发明专利]一种能与核酸信标发生特异性作用的物质的检测方法

摘要

本发明公开了一种能与核酸信标发生特异性作用的物质的检测方法，包括以下步骤：向一定浓度的一端标记荧光基团的核酸信标溶液中加入不同浓度的碳纳米颗粒溶液，孵育后，室温下测定荧光强度，得到猝灭曲线;若干组含一定浓度一端标记过荧光基团的核酸信标溶液中，加入不同浓度的目标物，孵育后，加入一定体积的碳纳米颗粒溶液，孵育后，室温下测定荧光强度，作标准曲线，计算目标物的浓度。本方法操作简便，原料易得，生物相容性好，可高效、灵敏、迅速、低成本地对生物分子进行检测。

主权项

一种能与核酸信标发生特异性作用的物质的检测方法，以碳纳米颗粒为荧光受体，其特征在于：包括以下步骤：  1）配制两组体积相同浓度相同的一端标记过荧光基团的核酸信标的系列标准缓冲溶液；2）向第一组一端标记过荧光基团的核酸信标的系列标准缓冲溶液中加入体积不同浓度相同的碳纳米颗粒溶液，得到体积不同的系列混合标准溶液；向每个混合标准溶液中补加缓冲溶液，使每个混合标准溶液的体积相同，孵育30~60 min；然后对每个混合标准溶液进行荧光检测，得到荧光猝灭效率最大时所需的碳纳米颗粒溶液的体积；3）以第二组一端标记过荧光基团的核酸信标的系列标准缓冲溶液中的一个标准溶液作为空白溶液不加入待测样品，其余的标准溶液分别加入相同浓度不同体积的待测样品，得到体积不同的系列混合待测样品标准溶液；然后向每个混合待测样品标准溶液中补加缓冲溶液，使每个混合待测样品标准溶液的体积相同，孵育20~120 min；向每个混合待测样品标准溶液中加入与步骤2）中荧光猝灭效率最大时相同体积的碳纳米颗粒溶液，得到系列样品标准溶液，孵育30~60 min，测定每个样品标准溶液的荧光强度，空白溶液的荧光强度为F0，对每个样品标准溶液的荧光强度与空白溶液的荧光强度F0的比值和待测样品的浓度进行标准曲线的绘制；4）向未知浓度的待测样品中加入与步骤3）中体积相同浓度相同的一端标记过荧光基团的核酸信标的系列标准缓冲溶液并补加缓冲溶液，得到混合待测样品溶液，使该混合待测样品溶液与步骤3）中每个混合待测样品标准溶液的体积相同，孵育20~120min；加入与步骤3）中相同体积的碳纳米颗粒溶液，孵育30~60min后，测定溶液的荧光强度，计算其与步骤3）中空白溶液荧光强度F0的比值，通过标准曲线得到该待测样品的浓度。