[发明专利]全自动细胞非染色图像识别计数方法

摘要

本发明公开了一种全自动细胞非染色图像识别计数方法，它选择图像识别法全自动细胞计数仪，将待测细胞悬液直接加入计数片并插入计数仪，通过降低感光芯片对红光R、绿光G光强度的接收能力、增强对蓝光B光强的接收能力的操作和手动调节曝光时间和曝光增益，使显示器的背景为浅蓝色，圆形亮斑为活细胞的图像，而比背景蓝色深的圆形蓝斑就是死细胞的图像，通过细胞图像识别软件分析，得到准确的对各种大小细胞活性分析数据。本发明无需使用染料可对细胞进行活性计数，避免使用台盼蓝染色给待检测细胞带来的潜在毒性，检测后的细胞可继续生存，在培养过程中进行活性计数，同时该发明能实现非染色实时在线细胞计数，可广泛应用于生命科学研究领域。

主权项

一种全自动细胞非染色图像识别计数方法，该方法选择图像识别法全自动细胞计数仪，该计数仪结构包括点光源（1）、凸透镜（2）、计数片（3）、调焦物镜（4）、滤光片（5）、感光芯片（6）、数据线（7）、控制器（8）、图像识别软件（9）、显示器（10）；其特征在于操作步骤如下：用移液器取待测细胞悬液，直接加入计数片（3）中并插入计数仪；打开感光芯片（6）的参数设置；降低红光R增益、绿光G增益，即降低感光芯片（6）对R、G光强的接收能力，此时仪器已经调至最佳值并设为默认值；增大蓝光B的增益，即增强了感光芯片（6）对B光强的接收能力；此时显示器（10）背景为浅蓝色，点光源（1）发出的光经凸透镜（2）、计数片（3）、调焦物镜（4）、滤色片（5）、感光芯片（6）将光信号转换成电信号，并经数据线（7）传输到控制器（8），最终在显示器（10）上显示的背景为浅蓝色，此时仪器已经调至最佳值并设为默认值；此时计数仪光路中的滤光片（5）阻止了R、G光的干扰，只允许B光通过，这时活细胞反射的B光强度大于死细胞反射的B光强度；关掉自动曝光功能 ，手动调节曝光时间和曝光增益，以能将死细胞图像与背景明显区分开为准，此时仪器已经调至最佳值并设为默认值，具体调节方法：活细胞反射的 蓝光B因强度大，首先在感光芯片（6）上成像，显示器（10）能逐渐看到比背景颜色深的圆形蓝斑；继续增加曝光时间，因为曝光时间过长，出现过曝现象，先出现的比背景颜色深的圆形蓝斑变为圆形亮斑，同时会有新的比背景颜色深的圆形蓝斑出现；此时，显示器（10）的背景是浅蓝色，圆形亮斑是活细胞的图像，而比背景蓝色深的圆形蓝斑就是死细胞的图像，通过细胞图像识别软件分析（9），得到准确的对各种大小细胞活性分析数据。