[发明专利]大规模筛查CCR5-Δ32基因型的方法及其引物有效
申请号: | 201310055046.9 | 申请日: | 2013-02-20 |
公开(公告)号: | CN103122388A | 公开(公告)日: | 2013-05-29 |
发明(设计)人: | 高劲松;张英杰 | 申请(专利权)人: | 沈阳优吉诺生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;G01N21/64 |
代理公司: | 沈阳晨创科技专利代理有限责任公司 21001 | 代理人: | 张晨 |
地址: | 110001 辽宁省沈阳市和*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明的目的在于提供一种大规模筛查CCR5-Δ32基因型的方法及其引物,所述方法通过荧光PCR直接判断有无曲线增长或观察荧光PCR后的溶解曲线,从而判断是否存在CCR5-Δ32基因型,以及该基因型是否是纯合子或杂合子,从标本加样到完成荧光PCR反应及结果判断,在1个半小时内完成,同时避免了PCR方法最大的缺点,即产物的污染问题,使得结果更准确可信,因此该方法非常适合对标本的大规模初筛。同时可以采用初筛和复查相结合的策略,既在初筛的基础上,可对疑似CCR5-Δ32基因型的标本,进行测序验证,从而保证结果的可靠性。该方法具有快速、准确、简单、成本低、能大规模进行筛选的优点,有利于基层现场的使用和推广。 | ||
搜索关键词: | 大规模 ccr5 32 基因型 方法 及其 引物 | ||
【主权项】:
大规模筛查CCR5‑Δ32基因型的引物,其特征在于,包括针对筛查CCR5‑Δ32基因型设计的五组特异性PCR引物,具体为:第一组:用于荧光染料PCR溶解曲线分析法筛查CCR5‑Δ32基因型的两条引物,序列为SEQ ID No:1和SEQ ID NO:2;第二组:用于构建CCR5‑Δ32基因型阳性质粒的快速突变基因位点引物,序列为SEQ ID No:3和SEQ ID NO:4;第三组:用于荧光染料PCR法直接筛查CCR5‑Δ32基因型的四条引物,序列为SEQ ID No:5、7、9和11;第四组:用于Taqman探针荧光PCR法筛查CCR5‑Δ32基因型的Taqman探针,序列为SEQ ID No:12;第五组:用于DNA测序法筛查CCR5‑Δ32基因型的引物,序列为SEQ ID No:13。
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