[发明专利]黄曲霉毒素阳性抗体基因库、构建方法、用途及黄曲霉毒素重组单链抗体1A7有效
申请号: | 201310054391.0 | 申请日: | 2013-02-20 |
公开(公告)号: | CN103215652A | 公开(公告)日: | 2013-07-24 |
发明(设计)人: | 李培武;李鑫;张奇;丁小霞;张文;李冉 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院油料作物研究所 |
主分类号: | C40B40/08 | 分类号: | C40B40/08;C40B50/06;C12N15/13;C12N15/10;C12N15/63;C07K16/14 |
代理公司: | 湖北武汉永嘉专利代理有限公司 42102 | 代理人: | 乔宇 |
地址: | 430062 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明涉及黄曲霉毒素阳性抗体基因库、构建方法、用途及黄曲霉毒素重组单链抗体1A7。该黄曲霉毒素阳性抗体基因库是将黄曲霉毒素单克隆抗体1C11、2C9、1C8、10G4、3G1的混合轻链可变区基因和混合重链可变区基因采用重叠延伸PCR方法随机拼接得到单链抗体ScFv基因,然后与pCANTAB5E载体连接与转化得到的。该阳性基因库完全由对黄曲霉毒素具有识别能力的抗体的基因片段(阳性片段)构建组成;在相对库容量不大的情况下,可实现黄曲霉素素单链抗体的快速筛选;黄曲霉毒素重组单链抗体1A7为通用单克隆抗体,对黄曲霉毒素B1的50%抑制浓度IC50为20pg/mL,对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1的交叉反应率分别为100%、166%、100%、0.1%和11.1%。 | ||
搜索关键词: | 黄曲霉 毒素 阳性 抗体 基因库 构建 方法 用途 重组 a7 | ||
【主权项】:
黄曲霉毒素阳性抗体基因库,其特征在于:它是将黄曲霉毒素单克隆抗体1C11、2C9、1C8、10G4、3G1的混合轻链可变区基因和混合重链可变区基因采用重叠延伸PCR方法随机拼接得到单链抗体ScFv基因,然后与pCANTAB 5E载体连接与转化得到的,所述的黄曲霉毒素单克隆抗体1C11、2C9、1C8、10G4、3G1分别由保藏编号为CCTCC NO: C201013,CCTCC NO: C201018,CCTCC NO: C201017,CCTCC NO: C201016,CCTCC NO: C201014的杂交瘤细胞株分泌产生。
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