[发明专利]一种以水产品及其加工下脚料为原料生物转化生产γ‑氨基丁酸的方法

摘要

本发明属于水产品生物加工技术领域，具体涉及一种利用水产品及其加工下脚料生物转化生产γ‑氨基丁酸的方法。将具有谷氨酸脱羧酶活性的乳酸菌按照0.5‑5％（V/V）的接种量接种至培养基中，并在30‑35℃发酵温度下，100‑500r/min的转速发酵培养20‑50小时，使发酵液中活菌数高达106‑107cfu/ml，待用；将转化液通过离心或者过滤除去菌体，取上清液减压浓缩制得GABA粗提液；粗提液用无水乙醇沉淀法去除杂质，然后用大孔树脂、葡聚糖凝胶、阳离子交换树脂依稀进行分离纯化，经分离纯化后的GABA产物经旋转蒸发、冷冻干燥，获得结晶。通过本发明技术，开辟了水产品及其加工下脚料的新的应用方向，为水产品全面的、高值的利用提供了理论基础。

主权项

一种以水产品及其加工下脚料为原料生物转化生产γ‑氨基丁酸的方法，其特征在于：(1)乳酸菌生物转化：将具有谷氨酸脱羧酶活性的乳酸菌按照0.5‑5％(V/V)的接种量接种至培养基中，并在30‑35℃发酵温度下，100‑500r/min的转速发酵培养20‑50小时，使发酵液中活菌数高达106‑107cfu/ml，待用；(2)γ‑氨基丁酸的分离纯化：将发酵液通过离心或者过滤除去菌体，取上清液减压浓缩制得GABA粗提液；粗提液用无水乙醇沉淀法去除杂质，然后用大孔树脂、葡聚糖凝胶、阳离子交换树脂依稀进行分离纯化，经分离纯化后的GABA产物经旋转蒸发、冷冻干燥，获得结晶；将步骤1所得发酵液采用能够特异性使GABA转化的转氨酶，将GABA生成琥珀酸半醛，利用所生成的琥珀酸半醛氧化时，所采用的辅酶氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸可定量地转变成还原型，其中所生成的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸偶联介由给电子体的水溶性腙的生成，由上述过程进而通过比色法对发酵液中GABA进行定量的检测；所述培养基按重量百分比计，为水产品及其水产品加工下脚料的发酵液10‑30％、葡萄糖0‑10％(W/W)，氯化钠0‑5.0％(W/W)，磷酸盐0.1‑50％(W/W)，谷氨酸或谷氨酸盐每隔3‑6小时间隔加入1‑5％(W/W)，余量为水。