[发明专利]一种大黄丹参提取物的指纹图谱的鉴别方法

摘要

本发明提供了大黄丹参提取物的指纹图谱鉴别方法，包括供试品溶液的制备、指纹图谱的测定、对照指纹图谱的确定和大黄丹参提取物指纹图谱的鉴别。通过对大黄丹参提取物进行高效液相色谱（HPLC）指纹图谱测定和分析，确定了9个大黄丹参提取物的特征峰，这些共有特征峰构成了大黄丹参提取物的指纹特征，可作为大黄丹参提取物的对照指纹图谱；对需要鉴别的大黄丹参提取物可以与对照指纹图谱进行比对，检查共有特征峰的情况，以鉴别质量。本发明具有方法简便、重现性好、特征峰明显、准确可靠等特点，有利于鉴别大黄丹参提取物的质量。

主权项

大黄丹参提取物的指纹图谱鉴别方法，其特征在于包括以下步骤：（1）大黄丹参提取物的制备方法：以大黄、丹参为原料，两味药材以重量份计为：大黄 70‑150g，丹参60‑120g；取大黄、丹参，混合，加水煎煮，煎液浓缩后加乙醇沉淀，吸取上清液，回收乙醇，再加入明胶溶液静置除鞣质，将除鞣质后的上清液制成；（2）供试品溶液的制备：精密吸取大黄丹参提取物供试品溶液0.5～1ml至10～20ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜0.22～0.45μm滤过，收取滤液，备用；（3）指纹图谱测定：取供试品溶液适量，注入高效液相色谱仪，记录75分钟以内的色谱图，得到由其共有特征峰构成的大黄丹参提取物对照高效液相指纹图谱；其中高效液相色谱分析的条件如下：用十八烷基键合硅胶为填充剂；Agilent Zorbax Eclipse XDB C18色谱柱4.6×250mm；乙腈‑0.01‑2%冰醋酸为流动相梯度洗脱，梯度程序为：0min→5min→30min→45min→60min→62min→75min对应流动相：乙腈：2%→7%→15%→20%→35%→50%→50%；0.01‑2%冰醋酸：98%→93%→85%→80%→65%→50%→50%，检测波长为200nm‑400nm；流速为0.2ml/min‑2ml/min；柱温为20℃‑50℃；所得到的大黄丹参提取物的对照指纹图谱有9个共有特征峰，其相对保留时间分别为：1号峰：0.13，2号峰：0.18，3号峰：0.29 ，4号峰：0.66，5号峰：0.86，6号峰：0.93，7号峰：0.97，8号峰（S）：1.00，9 号峰：1.01。