[发明专利]琼脂糖-聚乙烯亚胺-透明质酸接枝物及其制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种琼脂糖-聚乙烯亚胺-透明质酸接枝物及其制备方法与应用。本发明利用可溶性碳二亚胺和羰基二咪唑将胺羧及胺羟基以酰胺键化学连接，将透明质酸，聚乙烯亚胺和琼脂糖接枝，保留了透明质酸的生物活性和靶向性、聚乙烯亚胺的捕获基因和细胞相互作用特性，并且具有了琼脂糖的成凝胶特性，改善了生物降解性能，得到的微颗粒具有靶向性，在体内循环稳定性好，适用于靶向药物控释载体材料和组织工程支架材料。由于三种聚合物之间以酰胺键连接，容易在细胞以及生理环境下分解，为药物载体在细胞内充分释放所载药物创造条件。

主权项

一种琼脂糖‑聚乙烯亚胺‑透明质酸接枝物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）将琼脂糖按质量比0.5：99.5～5：95溶于90～95℃热水中，降温至45～60℃，加入10～30wt%过氧化氢，使琼脂糖的体积浓度为0.3～3%，45～60℃恒温反应3～15h，得到混合液；（2）将步骤（1）的混合液于50～70℃减压浓缩，得到浓缩液；往浓缩液中加入乙醇，离心，取沉淀；将沉淀按质量百分比5～10%溶于水中，得到溶液，用无水乙醇沉淀2～3次，离心，得到降解琼脂糖沉淀；将降解琼脂糖沉淀按质量百分比5～10%溶于水中，于‑20～‑65℃冷冻干燥10～17h，得降解琼脂糖粉末；（3）将步骤（2）的降解琼脂糖粉末按2～10%质量百分比溶于二甲亚砜，加入N,N′‑羰基二咪唑，N,N′‑羰基二咪唑在二甲亚砜中的浓度为1～3mM，室温反应1～5小时，得到反应液；用冷乙醇沉淀反应液，取沉淀，得到AG‑CDI；将AG‑CDI按质量百分比3～10%溶于二甲亚砜中，得到AG‑CDI溶液，4℃储存备用；将聚乙烯亚胺按质量百分比3～10%溶于二甲亚砜，加入AG‑CDI溶液，降解琼脂糖/聚乙烯亚胺质量比为1：1～1：5，冰水浴中混合后于1.5小时内加入三乙胺，于40～70℃反应5h后室温透析5～10天，‑20～‑65℃冷冻干燥10～17小时，得到琼脂糖接枝聚乙烯亚胺；降解琼脂糖与N,N′‑羰基二咪唑的质量比为2：1～1：5；降解琼脂糖与聚乙烯亚胺的质量比为1：1～1：15；三乙胺的质量为降解琼脂糖的质量的1～5%；（4）将步骤（3）的琼脂糖接枝聚乙烯亚胺溶于水中，配制成3～10wt%溶液，调节酸度至pH 4～6，加入透明质酸和碳二亚胺‑N‑羟基琥珀酰亚胺，于室温、氮气保护下反应3～5h后透析5～10天，‑20～‑65℃冷冻干燥10～17小时，得到琼脂糖‑聚乙烯亚胺‑透明质酸接枝物；降解琼脂糖与透明质酸的质量比为1：1～1：10；降解琼脂糖与碳二亚胺‑N‑羟基琥珀酰亚胺的质量比为3：1～1：5。