[发明专利]琼脂糖-聚乙烯亚胺-透明质酸接枝物及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种琼脂糖-聚乙烯亚胺-透明质酸接枝物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）将琼脂糖按质量比0.5：99.5～5：95溶于90～95℃热水中，降温至45～60℃，加入10～30wt%过氧化氢，使琼脂糖的体积浓度为0.3～3%，45～60℃恒温反应3～15h，得到混合液；

（2）将步骤（1）的混合液于50～70℃减压浓缩，得到浓缩液；往浓缩液中加入乙醇，离心，取沉淀；将沉淀按质量百分比5～10%溶于水中，得到溶液，用无水乙醇沉淀2～3次，离心，得到降解琼脂糖沉淀；将降解琼脂糖沉淀按质量百分比5～10%溶于水中，于-20～-65℃冷冻干燥10～17h，得降解琼脂糖粉末；

（3）将步骤（2）的降解琼脂糖粉末按2～10%质量百分比溶于二甲亚砜，加入N,N′-羰基二咪唑，N,N′-羰基二咪唑在二甲亚砜中的浓度为1～3mM，室温反应1～5小时，得到反应液；用冷乙醇沉淀反应液，取沉淀，得到AG-CDI；将AG-CDI按质量百分比3～10%溶于二甲亚砜中，得到AG-CDI溶液，4℃储存备用；将聚乙烯亚胺按质量百分比3～10%溶于二甲亚砜，加入AG-CDI溶液，降解琼脂糖/聚乙烯亚胺质量比为1：1～1：5，冰水浴中混合后于1.5小时内加入三乙胺，于40～70℃反应5h后室温透析5～10天，-20～-65℃冷冻干燥10～17小时，得到琼脂糖接枝聚乙烯亚胺；降解琼脂糖与N,N′-羰基二咪唑的质量比为2：1～1：5；降解琼脂糖与聚乙烯亚胺的质量比为1：1～1：15；三乙胺的质量为降解琼脂糖的质量的1～5%；

（4）将步骤（3）的琼脂糖接枝聚乙烯亚胺溶于水中，配制成3～10wt%溶液，调节酸度至pH 4～6，加入透明质酸和碳二亚胺-N-羟基琥珀酰亚胺，于室温、氮气保护下反应3～5h后透析5～10天，-20～-65℃冷冻干燥10～17小时，得到琼脂糖-聚乙烯亚胺-透明质酸接枝物；降解琼脂糖与透明质酸的质量比为1：1～1：10；降解琼脂糖与碳二亚胺-N-羟基琥珀酰亚胺的质量比为3：1～1：5。

2.根据权利要求1所述的琼脂糖-聚乙烯亚胺-透明质酸接枝物的制备方法，其特征在于：步骤（1）中所述的琼脂糖的分子量为100～300kDa。

3.根据权利要求1所述的琼脂糖-聚乙烯亚胺-透明质酸接枝物的制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述的浓缩液的体积为混合液体积的10～15%；所述的乙醇的体积为浓缩液体积的2～5倍。

4.根据权利要求1所述的琼脂糖-聚乙烯亚胺-透明质酸接枝物的制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述的离心的条件为于室温、1500～4000转/分离心2～5分钟；所述的无水乙醇的体积为溶液体积的2～3倍。

5.根据权利要求1所述的琼脂糖-聚乙烯亚胺-透明质酸接枝物的制备方法，其特征在于：步骤（3）中所述的聚乙烯亚胺的分子量为1～10kDa。

6.根据权利要求1所述的琼脂糖-聚乙烯亚胺-透明质酸接枝物的制备方法，其特征在于：步骤（3）中所述的冷乙醇的体积为反应液体积的1～3倍；所述的透析在双蒸水中、用截留2～5kDa分子量的透析袋进行透析。

7.根据权利要求1所述的琼脂糖-聚乙烯亚胺-透明质酸接枝物的制备方法，其特征在于：步骤（4）中所述的透明质酸的分子量为1～50kDa。

8.根据权利要求1所述的琼脂糖-聚乙烯亚胺-透明质酸接枝物的制备方法，其特征在于：步骤（4）中所述的酸度的调节采用0.01～0.05wt%盐酸进行调节；所述的透析在双蒸水中、用截留2～5kDa分子量的透析袋进行透析。

9.一种琼脂糖-聚乙烯亚胺-透明质酸接枝物，由权利要求1～8任一项所述的制备方法得到。

10.权利要求9所述的琼脂糖-聚乙烯亚胺-透明质酸接枝物在制备靶向药物控释载体或组织工程支架中进行应用。