[发明专利]检测G-四联体螺旋形成的方法有效
| 申请号： | 201280006979.2 | 申请日： | 2012-06-15 |
| 公开（公告）号： | CN103403158A | 公开（公告）日： | 2013-11-20 |
| 发明（设计）人： | 三好大辅 | 申请（专利权）人： | 松下电器产业株式会社 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12Q1/68;G01N21/78 |
| 代理公司： | 北京尚诚知识产权代理有限公司 11322 | 代理人： | 龙淳 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 日本;JP |
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| 摘要： | 本发明的方法的目的在于，即使在钾离子存在下，也特异地检测G-四联体螺旋。本发明的方法利用在钾离子的存在下硫代黄素T和G-四联体螺旋的反应时发出强的荧光的现象，判定靶DNA是否形成了G-四联体螺旋。本发明的方法中，在G-四联体螺旋形成的条件下维持含有钾离子和靶DNA的第一试样溶液之后，添加硫代黄素T，测定第一荧光强度值。在G-四联体螺旋不稳定的条件下维持含有靶DNA的第二试样溶液，添加硫代黄素T，测定第二荧光强度值，如果这些值之差为0以上，则判定为靶DNA能够形成G-四联体螺旋。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 联体 螺旋 形成 方法 | ||
【主权项】：
一种判定靶DNA在钾离子存在下是否形成了G‑四联体螺旋的方法，其特征在于，具备以下的工序： 在G‑四联体螺旋形成的反应条件下维持含有钾离子、硫代黄素T和所述靶DNA的第一试样溶液的工序； 测定λ1的波长时的第一荧光强度值A的工序，其中， 所述第一荧光强度值A来自所述第一试样溶液中所含有的硫代黄素T， λ1为465纳米以上、505纳米以下； 在使所述G‑四联体螺旋的结构不稳定化的条件下维持含有硫代黄素T和所述靶DNA的第二试样溶液的工序； 测定所述λ1的波长时的第二荧光强度值B的工序，其中， 所述第二荧光强度值B来自所述第二试样溶液中所含有的硫代黄素T；和， 如果满足以下不等式，则判定为所述靶DNA在钾离子存在下形成了所述G‑四联体螺旋的工序， 所述第一荧光强度值A－所述第二荧光强度值B＞0。
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