[发明专利]一种植物乳杆菌定量检测方法及其检测试剂盒和应用有效
申请号: | 201210594264.5 | 申请日: | 2012-12-31 |
公开(公告)号: | CN102994644A | 公开(公告)日: | 2013-03-27 |
发明(设计)人: | 陈臣;任婧;周方方;艾连中 | 申请(专利权)人: | 光明乳业股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/06;C12N15/11;C12R1/25 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人: | 朱水平;沈利 |
地址: | 201103 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种植物乳杆菌定量检测方法及其检测试剂盒和应用。该植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)定量检测方法包括:(1)提取待检样品的总RNA;(2)将提取的总RNA反转录成cDNA;(3)采用特异性扩增植物乳杆菌的引物对,以所得cDNA为模板,进行荧光定量PCR扩增,其中上游引物序列如SEQ ID No:1所示;下游引物序列如SEQ ID No:2所示;(4)通过比较待检样品的Ct值和定量外标准品的标准曲线测定其中植物乳杆菌数量。本方法能够有效排除其他细菌,尤其是近缘菌的干扰,只检测样品中存活的植物乳杆菌数量。本发明所述植物乳杆菌定量检测试剂盒使用简便,检测效率高。 | ||
搜索关键词: | 一种 植物 杆菌 定量 检测 方法 及其 试剂盒 应用 | ||
【主权项】:
一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)定量检测方法,其特征在于,所述植物乳杆菌定量检测方法包括以下步骤:(1)提取待检样品的总RNA;(2)将步骤(1)提取的总RNA反转录成cDNA;(3)采用特异性扩增植物乳杆菌的引物对,以步骤(2)所得cDNA为模板,进行荧光定量PCR扩增检测,其中所述特异性扩增植物乳杆菌的引物对为:上游检测引物,其序列如序列表中SEQ ID No:1所示;下游检测引物,其序列如序列表中SEQ ID No:2所示;(4)通过比较待检样品的Ct值和定量外标准品的标准曲线测定样品中植物乳杆菌的数量。
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