[发明专利]一种猪肺炎支原体的培养方法无效
| 申请号： | 201210583255.6 | 申请日： | 2012-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN103013892A | 公开（公告）日： | 2013-04-03 |
| 发明（设计）人： | 陈欣;张凤强;刘洪斌;付丽杰;左颖;赵凯;王旭然 | 申请（专利权）人： | 哈药集团生物疫苗有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12R1/35 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨 |
| 地址： | 150069 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种猪肺炎支原体的培养方法，包括种子液的制备和菌液的制备，与传统方法的不同在于菌液制备过程中，本发明每12h加入1mol/LNaOH将含有4ml/L酚红的PPLO培养基pH调至8.0。采用本发明的方法缩短了猪肺炎支原体的培养时间，降低了中间多次取样检测的程序，减少了培养过程中污染的可能性，并降低了由于人工操作带来的误差。 | ||
| 搜索关键词： | 种猪 肺炎 支原体 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种猪肺炎支原体的培养方法，其特征在于培养步骤如下：（1）种子液的制备：①一级种子繁殖及鉴定启封冷冻菌种，用培养基将其融化复原，然后以10%（v/v）的量接种于含有4ml/L酚红的PPLO培养基中，37℃培养15‑96h，纯度检验合格后作为一级种子备用；②二级种子繁殖及鉴定取一级种子按接种量10%（v/v）接种于含有4ml/L酚红的PPLO培养基中，37±2℃培养15‑96h，纯度检验合格后作为二级种子备用；③种子罐制备取二级种子按接种量10%（v/v）接种于含有4ml/L酚红的PPLO培养基中，温度控制37±2℃，通气培养15‑96h，纯度检验合格后备用；（2）菌液制备以合格的种子液按5%‑20%（V/V）的量接种到含有4ml/L酚红的PPLO培养基，pH值8.0±0.5，温度控制37±2℃，通气培养，并每12h加入1mol/L NaOH将PPLO培养基pH调至8.0，纯度检验和活菌计数，至所需支原体浓度的量。
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