[发明专利]腹水型抗体的纯化方法在审

专利信息
申请号: 201210572265.X 申请日: 2012-12-25
公开(公告)号: CN103897019A 公开(公告)日: 2014-07-02
发明(设计)人: 万晓春;王彩霞;王宏 申请(专利权)人: 深圳先进技术研究院
主分类号: C07K1/36 分类号: C07K1/36;C07K1/30;C07K1/22
代理公司: 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 代理人: 吴平
地址: 518055 广东省深圳*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 一种腹水型抗体的纯化方法,包括如下步骤:在4℃将小鼠腹水离心,取清液;在清液中加入磷酸盐缓冲液进行稀释,再搅拌加入饱和的硫酸铵溶液,直至饱和度达到45%~50%,静置析晶后,经离心,得到沉淀物;在沉淀物中加入磷酸盐缓冲液溶解,得到的溶液经过0.45微米滤膜,使用葡聚糖凝胶G25脱盐柱脱盐,使用磷酸盐缓冲液进行平衡和洗脱,收集蛋白溶液;将蛋白溶液上样至Protein A/G亲和柱,再用磷酸盐缓冲液将杂蛋白从亲和柱上洗脱,然后用甘氨酸-盐酸溶液将抗体从亲和柱上洗脱,得到抗体溶液。上述腹水型抗体的纯化方法大幅度的提高了抗体的纯度,使得抗体的纯度大于90%。
搜索关键词: 腹水 抗体 纯化 方法
【主权项】:
一种腹水型抗体的纯化方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一:在4℃将小鼠腹水离心,取清液;步骤二:在所述清液中加入磷酸盐缓冲液进行稀释,再搅拌加入饱和的硫酸铵溶液,直至饱和度达到45%~50%,静置析晶后,经离心,得到沉淀物;步骤三:在所述沉淀物中加入磷酸盐缓冲液溶解,得到的溶液经0.45微米滤膜过滤,使用葡聚糖凝胶G25脱盐柱脱盐,使用磷酸盐缓冲液进行平衡和洗脱,收集蛋白溶液;及步骤四:将所述蛋白溶液上样至Protein A/G亲和柱上,并用磷酸盐缓冲液将杂蛋白从所述Protein A/G亲和柱上洗脱,然后用甘氨酸‑盐酸溶液将抗体从所述Protein A/G亲和柱上洗脱,得到抗体溶液。
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