[发明专利]猪细小病毒的培养方法无效
| 申请号： | 201210550709.X | 申请日： | 2012-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN103865885A | 公开（公告）日： | 2014-06-18 |
| 发明（设计）人： | 张述智;夏伟;朱绍辉;张浩;王晓丽;徐权汗;李之详;许团辉 | 申请（专利权）人： | 青岛中仁药业有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266300 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种猪细小病毒的培养方法，利用猪睾丸传代细胞（ST）细胞作为猪细小病毒培养的细胞源，在细胞传代的同时接种病毒，从而进行病毒的增殖培养。工艺简便、生长量大、得率高、成本低廉的特点，并且利用本发明培养的猪细小病毒制备的疫苗对猪细小病毒病具有完全的防治作用，具有很好的社会效益和应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 细小 病毒 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种猪细小病毒的培养方法，其特征在于：包括以下步骤：（1） 细胞传代，将长满细胞瓶的生长状态良好的ST细胞用胰酶‑EDTA溶液进行消化，待细胞松动后，加入MEM细胞培养液，并用吸管将消化下来的细胞吹散均匀，倒出4/5的细胞悬液，再加入等量的细胞培养液，即将细胞密度稀释为原来的5倍；（2） 病毒增殖，将PPV毒种2 %同步接种ST细胞，并同时设未接毒的正常对照细胞，置37 ℃、5 % CO2 培养箱培养，接毒后16h换用不含血清的MEM细胞培养液，每天观察细胞病变CPE并记录病变情况，当细胞出现80 % CPE时收毒，冻融3次，1 500 r•min‑1离心l5 min，小瓶分装上清液备用，按此方法传代至第3 次， ‑70 ℃冰柜保存备用。
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