[发明专利]利用双启动子表达载体在家蚕幼虫中表达家蚕抗菌肽CecropinB2的方法无效
| 申请号： | 201210504848.9 | 申请日： | 2012-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN102994551A | 公开（公告）日： | 2013-03-27 |
| 发明（设计）人： | 徐家萍;李昕琦;杜畅;王文兵;高娟;王成林 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/866 | 分类号： | C12N15/866 |
| 代理公司： | 安徽汇朴律师事务所 34116 | 代理人： | 胡敏 |
| 地址： | 230036 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用双启动子表达载体在家蚕幼虫中表达家蚕抗菌肽CecropinB2的方法。步骤包括：将BmCecB2基因及polh基因分别克隆到启动子表达载体以构建重组双启动子表达载体；将重组双启动子表达载体转化到DH10Bac感受态细胞中，提取质粒，获得重组穿梭载体Bacmid；Bacmid在转染试剂脂质体介导下转染家蚕培养细胞，获得重组病毒多角体；重组病毒多角体定量后以经口接种五龄家蚕幼虫的方式，在家蚕幼虫中表达，获得具有抑菌活性的抗菌肽本发明的有益效果在于经口添食家蚕，使家蚕抗菌肽Cecropin B基因在家蚕体中表达，与人工注射家蚕相比，省时省力，提高了生产效率。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 启动子 表达 载体 家蚕 幼虫 抗菌 cecropinb2 方法 | ||
【主权项】：
一种利用双启动子表达载体在家蚕幼虫中表达家蚕抗菌肽CecropinB2的方法，其特征在于，步骤包括：将如序列表所示BmCecB2基因及polh基因分别克隆到启动子表达载体以构建重组双启动子表达载体；将重组双启动子表达载体转化到DH10Bac感受态细胞中，提取质粒，获得重组穿梭载体Bacmid；Bacmid在转染试剂脂质体介导下转染家蚕培养细胞，获得重组病毒多角体；重组病毒多角体定量后以经口接种五龄家蚕幼虫的方式，在家蚕幼虫中表达，获得具有抑菌活性的抗菌肽。
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