[发明专利]一种生产降解木质素酶的方法无效
| 申请号： | 201210498993.0 | 申请日： | 2012-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN103205403A | 公开（公告）日： | 2013-07-17 |
| 发明（设计）人： | 张爱联;符仙;杨穗珊;尹慧祥;张添元;罗进贤 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N9/08 | 分类号： | C12N9/08;C12N9/02;C12N15/81;C12R1/84;C12R1/865 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 571101 海南省海口市学院*** | 国省代码： | 海南;66 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种生产降解木质素酶的方法。属生物技术领域。首先分别从微生物中克隆木质素过氧化物酶，猛过氧化物酶和漆酶基因；构建含上述三种基因表达框架的毕赤酵母表达载体和酿酒酵母表达载体，并将载体转化相应的宿主菌而获得工程菌。分别发酵毕赤酵母工程菌和酿酒酵母工程菌生产重组木质素过氧化物酶，猛过氧化物酶和漆酶。本发明的优点体现于：用工程菌取代天然菌株生产木质素过氧化物酶、猛过氧化物酶和漆酶，通过增加基因拷贝数而提高酶的产量；用含三种酶基因表达框架的工程菌取代含单一酶基因表达框架的工程菌生产其中的单一种酶，节省了原材料、能耗和人力资源。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 生产 降解 木质素 方法 | ||
【主权项】：
一种生产降解木质素酶的方法，其特征在于，其具体步骤如下：1)、应用分子生物学技术从微生物中克隆木质素过氧化物酶基因、锰过氧化物酶基因和漆酶基因；2)、分别构建含上述基因的表达框架的毕赤酵母表达载体和酿酒酵母表达载体；3)、将上述构建的毕赤酵母表达载体转化毕赤酵母获得毕赤酵母重组子，将上述构建的酿酒酵母表达载体转化酿酒酵母获得酿酒酵母重组子；4)、筛选高表达以上所述的木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶的毕赤酵母重组子作为毕赤酵母工程菌；筛选高表达以上所述的木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶的酿酒酵母重组子作为酿酒酵母工程菌；5)、分别发酵以上所述的毕赤酵母工程菌和酿酒酵母工程菌生产木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶。
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