[发明专利]一种天麻中总DNA的提取方法无效
申请号: | 201210489791.X | 申请日: | 2012-11-27 |
公开(公告)号: | CN103834635A | 公开(公告)日: | 2014-06-04 |
发明(设计)人: | 杨超 | 申请(专利权)人: | 杨超 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C07H21/04;C07H1/08 |
代理公司: | 成都天嘉专利事务所(普通合伙) 51211 | 代理人: | 苏丹 |
地址: | 610000 四川省成都市*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明涉及一种天麻中总DNA的提取方法,属于中药DNA提取分离技术领域。本发明采用CTAB提取和SDS提取结合的方式对天麻中的总DNA进行提取,解决了现有技术无法提取天麻中总DNA的问题,能够快速、高效的提取出天麻中的总DNA,且提取出来的总DNA纯度高、稳定性好。 | ||
搜索关键词: | 一种 天麻 dna 提取 方法 | ||
【主权项】:
一种天麻中总DNA的提取方法,其特征在于:包括以下工艺步骤:A、预处理将天麻干燥,然后粉碎成天麻粉末,再研磨成微末;B、CTAB提取向步骤A得到的天麻微末中加入60‑70℃的十六烷基三甲基溴化铵缓冲液,在65‑85℃的水浴中加热25‑45分钟,加入四氢呋喃和丙酮,离心分离,取上清液备用;C、SDS提取向步骤B得到的上清液中加入65‑70℃的十二烷基硫酸钠缓冲液,混合均匀后保温放置20‑35分钟,在2‑5℃下离心分离,取上清液,加入氯仿和异丙醇,再在常温下进行一次离心分离,置于‑10‑1℃下40‑50分钟,去除上清液,将其沉淀用乙醇洗2‑5次,再加入RNA水解酶,在35‑46℃下保温1‑2小时得到天麻总DNA提取物。
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