[发明专利]乳糖化肝细胞靶向病毒载体的制备方法

摘要

本发明揭示了一种乳糖化肝细胞靶向病毒载体的制备方法，包括：步骤一：将轮状病毒结构蛋白VP2或者VP6的基因构建到蛋白表达质粒pET系列载体上，得到表达质粒pET-VP2或者pET-VP6；步骤二：将pET-VP2或者pET-VP6转化大肠杆菌，表达出包涵体蛋白IB；步骤三：IB经复性和重新折叠后，形成蛋白R-VP2或者R-VP6；步骤四：将R-VP2或者R-VP6与抗癌药物进行交联，形成共轭物；步骤五：将共轭物进行自组装，形成携带有抗癌药物的病毒样颗粒；步骤六：将靶向配体乳糖酸共价交联到携带有抗癌药物的病毒样颗粒的外表面，得到乳糖化肝细胞靶向病毒载体。本发明能特异性识别肝癌细胞HepG2，使所携带的药物在肝癌细胞中能进行释放并产生细胞毒性，为肝癌的靶向药物治疗提供了新途径。

主权项

一种乳糖化肝细胞靶向病毒载体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：步骤一：将轮状病毒结构蛋白VP2或者VP6的基因构建到蛋白表达质粒pET系列载体上，得到含有轮状病毒结构蛋白的表达质粒pET‑VP2或者pET‑VP6；步骤二：将步骤一得到的含有轮状病毒结构蛋白的表达质粒pET‑VP2或者pET‑VP6转化大肠杆菌，表达出包涵体蛋白IB；步骤三：所述包涵体蛋白IB经复性和重新折叠后，形成有活性的蛋白R‑VP2或者R‑VP6；步骤四：将步骤三得到的蛋白R‑VP2或者R‑VP6与抗癌药物进行交联，形成抗癌药物与蛋白R‑VP2或者R‑VP6的共轭物；步骤五：将步骤四得到抗癌药物与蛋白R‑VP2或者R‑VP6的共轭物进行自组装，形成携带有抗癌药物的病毒样颗粒；步骤六：将靶向配体乳糖酸共价交联到所述携带有抗癌药物的病毒样颗粒的外表面，得到乳糖化肝细胞靶向病毒载体。