[发明专利]检测EGFR基因突变的引物、探针及其试剂盒和使用方法有效
申请号: | 201210334208.8 | 申请日: | 2012-09-11 |
公开(公告)号: | CN102851375A | 公开(公告)日: | 2013-01-02 |
发明(设计)人: | 熊慧;程新建;谢立群;陈嘉铮;包文静;陶慧卿;丁璐;徐任;占闽宁;杨青喜 | 申请(专利权)人: | 上海源奇生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
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地址: | 201400 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及基因突变检测领域,具体讲,涉及一种检测EGFR基因突变的引物、探针及其试剂盒和使用方法。本发明的试剂盒能检出含0.1-1%EGFR基因突变DNA的样本、对含10%EGFR19号外显子基因突变DNA样本,通过测序能准确分型;本发明的试剂盒灵敏度高,最低检出限为5拷贝基因,并能对EGFR基因突变的定性检测,给出不同的灵敏度参考范围,以帮助临床判断突变量的多少,确定最终诊疗方案能对不同突变。 | ||
搜索关键词: | 检测 egfr 基因突变 引物 探针 及其 试剂盒 使用方法 | ||
【主权项】:
一种检测人EGFR基因突变的引物和探针,其中,所述引物和探针的核苷酸序列为:(1)用于检测18号外显子突变的引物和探针为:由SEQ ID NO∶1所示的上游引物,由SEQ ID NO∶2所示的下游引物,由SEQ ID NO∶3或SEQ ID NO∶27所示的探针;(2)用于检测19号外显子突变的引物和探针为:由SEQ ID NO∶4所示的上游引物,由SEQ ID NO∶5~SEQ ID NO∶13所示的下游引物,由SEQ ID NO∶14所示的探针;(3)用于检测20号外显子突变的引物和探针为:由SEQ ID NO∶15~SEQ ID NO∶17所示的上游引物,由SEQ ID NO∶18所示的下游引物,由SEQ ID NO∶19所示的探针;(4)用于检测21号外显子突变的引物和探针为:由SEQ ID NO∶20所示的上游引物,由SEQ ID NO∶21所示的下游引物,由SEQ ID NO∶22~SEQ ID NO∶23所示的探针;(5)作为内参的引物和探针:由SEQ ID NO∶24所示的上游引物,由SEQ ID NO∶25所示的下游引物,由SEQ ID NO∶26所示的探针;其中,所述探针的核苷酸链的5’端均标记有FAM,3’端均标记有TAMRA。
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