[发明专利]一种猪小肠抗菌肽PR39的制备方法无效
申请号: | 201210305972.2 | 申请日: | 2012-08-23 |
公开(公告)号: | CN102816226A | 公开(公告)日: | 2012-12-12 |
发明(设计)人: | 吴红云;韩改会;徐进 | 申请(专利权)人: | 郑州后羿制药有限公司 |
主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C07K1/16 |
代理公司: | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人: | 牛爱周 |
地址: | 451162 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公开了一种猪小肠抗菌肽PR39的制备方法,具体步骤如下:1)取猪小肠粘膜,冲洗;2)加入体积分数4-5%的乙酸冰水混合物,捣碎制匀浆;3)沸水浴10min,冷却至0-10℃;4)离心,上清液超声波裂解30s,搅拌浸提,离心,取上清液;5)沉淀物用体积分数4-5%的乙酸混合,搅拌浸提,离心,取上清液;6)合并上清液,离心,取上清液;7)将上清液上样于Sephadex G2100凝胶柱层析,收集洗脱液;8)采用琼脂糖弥散方法检测各收集管液体的抗菌性,收集有抑菌作用的洗脱液,得到猪小肠抗菌肽PR39,真空冷冻干燥保存。本发明工艺简单,成本低廉,去除了大多数的杂蛋白,提取率高。 | ||
搜索关键词: | 种猪 小肠 抗菌 pr39 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种猪小肠抗菌肽PR39的制备方法,其特征在于,具体步骤如下:1)取猪小肠粘膜用灭菌生理盐水冲洗;2)按照20ml/g的比例加入体积分数4‑5%的乙酸冰水混合物,捣碎制匀浆;3)90‑100℃水浴10min,后迅速冷却至0‑10℃;4)离心,取上清液置冰上超声波裂解30s,4℃搅拌浸提,再离心,取上清液;5)将离心的沉淀物用等体积的体积分数4‑5%的乙酸混合,搅拌浸提,离心,取上清液;6)合并步骤4)和步骤5)得到的上清液,调节pH=5‑6.5,离心,取上清液;7)将上清液上样于Sephadex G2100凝胶柱层析,收集洗脱液;8)采用琼脂糖弥散方法检测各收集管液体的抗菌性,收集有抑菌作用的洗脱液,得到猪小肠抗菌肽PR39,真空冷冻干燥保存。
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