[发明专利]一种猪小肠抗菌肽PR39的制备方法无效
| 申请号： | 201210305972.2 | 申请日： | 2012-08-23 |
| 公开（公告）号： | CN102816226A | 公开（公告）日： | 2012-12-12 |
| 发明（设计）人： | 吴红云;韩改会;徐进 | 申请（专利权）人： | 郑州后羿制药有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/47 | 分类号： | C07K14/47;C07K1/16 |
| 代理公司： | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人： | 牛爱周 |
| 地址： | 451162 河南*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种猪 小肠 抗菌 pr39 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种猪小肠抗菌肽PR39的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：
1）取猪小肠粘膜用灭菌生理盐水冲洗；
2）按照20ml/g的比例加入体积分数4-5%的乙酸冰水混合物，捣碎制匀浆；
3）90-100℃水浴10min，后迅速冷却至0-10℃；
4）离心，取上清液置冰上超声波裂解30s，4℃搅拌浸提，再离心，取上清液；
5）将离心的沉淀物用等体积的体积分数4-5%的乙酸混合，搅拌浸提，离心，取上清液；
6）合并步骤4）和步骤5）得到的上清液，调节pH=5-6.5，离心，取上清液；
7）将上清液上样于Sephadex G2100凝胶柱层析，收集洗脱液；
8）采用琼脂糖弥散方法检测各收集管液体的抗菌性，收集有抑菌作用的洗脱液，得到猪小肠抗菌肽PR39，真空冷冻干燥保存。
2.根据权利要求1所述的一种猪小肠抗菌肽PR39的制备方法，其特征在于，所述的Sephadex G2100层析洗脱液为0.2mol/L乙酸钠溶液，恒流泵的速度为30r/min。
3.根据权利要求1所述的一种猪小肠抗菌肽PR39的制备方法，其特征在于，所述的离心温度为4℃，转速为8000rpm/min，时间为30min。
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