[发明专利]人异基因有核细胞工业化制备自然杀伤性细胞(NK)及注射液有效
申请号: | 201210288669.6 | 申请日: | 2012-08-15 |
公开(公告)号: | CN102988415A | 公开(公告)日: | 2013-03-27 |
发明(设计)人: | 王沁怡;王怀林 | 申请(专利权)人: | 王沁怡;王怀林 |
主分类号: | A61K35/14 | 分类号: | A61K35/14;A61K35/44;A61K9/10;A61P37/04;A61P35/00;C12N5/0783 |
代理公司: | 宁夏专利服务中心 64100 | 代理人: | 叶学军 |
地址: | 750001 宁夏回族*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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摘要: | 本发明涉及一种人异基因有核细胞工业化制备自然杀伤性细胞(NK)及注射液,以合法来源的脐带血或者外周血为原料,采用有核细胞分离提取方法获得干细胞或者使用Ficoll或percoll密度梯度离心法分选出有核细胞;将上述有核细胞用细胞培养液稀释,再加上干扰素、白介素、CD3抗体、人血白蛋白,一起灌装至生物反应器中进行灌流培养,然后进行扩增培养;扩增培养自然杀伤细胞(NK)的传代次数不小于8代,时间不少于4周;扩增培养后获得的自然杀伤细胞(NK)的标志物为CD3-、CD56+、CD16+、CD57+、CD8+,其中CD16+/CD56+≥15%,CD3-/CD56+≥50%,CD8+/CD57+≥8%,将以上方法获得的细胞悬液配制成一定浓度的注射液,即为成品。 | ||
搜索关键词: | 基因 细胞 工业化 制备 自然 杀伤性 nk 注射液 | ||
【主权项】:
一种人异基因有核细胞工业化制备的自然杀伤性细胞(NK)注射液,以合法来源的脐带血或者外周血为原料,采用有核细胞分离提取方法获得干细胞或者使用Ficoll或percoll密度梯度离心法分选出有核细胞;将上述有核细胞用细胞培养液稀释,再加上干扰素、白介素、CD3抗体、人血白蛋白,一起灌装至生物反应器中进行灌流培养,然后进行扩增培养;扩增培养自然杀伤细胞(NK)的传代次数不小于8代,时间不少于4周;扩增培养后获得的自然杀伤细胞(NK)的标志物为CD3‑、CD56+、CD16+、CD57+、CD8+,其中CD16+/CD56+≥15%,CD3‑/CD56+≥50%,CD8+/CD57+≥8%,将以上方法获得的细胞悬液配制成一定浓度的注射液,即为成品。
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