[发明专利]基于TAS途径增强病毒诱导基因沉默效率的方法及应用有效
| 申请号： | 201210250444.1 | 申请日： | 2012-07-19 |
| 公开（公告）号： | CN102851310A | 公开（公告）日： | 2013-01-02 |
| 发明（设计）人： | 周雪平;顾周杭;吴建祥 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/84 | 分类号： | C12N15/84;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 张法高 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于trans-acting smallRNA即TAS途径增强病毒诱导基因沉默效率的方法及应用。本发明通过对沉默载体中靶基因片段进行修饰，从而达到增强基因沉默效率的效果。该方法一方面提高了单位长度基因沉默效率，另一方面也提供了一种特异沉默植物同一家族中单个成员的新方法，从而为植物基因组功能的分析和研究服务。本发明构建棉花皱叶病毒基因沉默载体，并对该载体中插入沉默靶基因序列进行修饰，从而使该沉默载体通过TAS途径对宿主进行高效基因沉默。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 tas 途径 增强 病毒 诱导 基因 沉默 效率 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种基于trans‑acting smallRNA即TAS途径以增强病毒诱导基因沉默效率的方法，其特征在于通过分子生物学方法对植物病毒沉默载体中沉默靶基因片段进行修饰，使其同时含有如下序列：5’TS（5’‑GTGATTTTTCTCTACAAGCGAA‑3’）的5’TS结构和3’MIR(5’‑ATATTTGGAGACCGTCAGATTCGAATCTGAACAAAGCATAAAAAAGTCAACAAAACTTAAAGCGGCGGTCTCATCGTAATCTCAGCCCAATACCCTATTTTCCTCTCCCCTATATAAATACTTTCTTCTTCTACTGATCTTCTTCTCACAAATAAACCCAAATATATCAATCTACTGTGTTGGTGATTAAGTACTTTCGCTTGCAGAGAGAAATCACAGTGGTCAAAAAAGTTGTAGTTTTCTTAAAGTCTCTTTCCTCTGTGATTCTCTGTGTAAGCGAAAGAGCTTGCTCCCTAAACTTATCTCTCTGATGATTTAATGTTAGAGATCTTCGTAAATCTATGTGTTTGATAGATCTGATGCGTTTTTTGAGTTGATGATTTGATTATTTTTCACTGGAAAGTATCTCATTAGGGTAACGATAATGTTTTATGGATTTGGTTGTATAACAGATCCATGAAATCTTGACTGGTTATAAAATCTGAATAATGTATTTCAAT‑3’)的miR73前体片段两部分序列，以达到增强基因沉默效率。
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