[发明专利]产低温乳糖酶的拉恩氏菌筛选及培养方法无效
| 申请号： | 201210228731.2 | 申请日： | 2012-07-04 |
| 公开（公告）号： | CN102965287A | 公开（公告）日： | 2013-03-13 |
| 发明（设计）人： | 杨瑞金;沈莲莲;华霄 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/04 | 分类号： | C12N1/04;C12N9/38;C12N1/20;C12R1/01 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明是一种拉恩氏菌R3(Rahnella sp.R3)筛选及培养方法，采用细菌富集培养基(1/4TSB)及以乳糖为底物、X-Gal为显色剂琼脂鉴定平板初筛与发酵酶活测定复筛的方法获得高产低温乳糖酶菌株Rahnella sp.R3。采用单因素实验与正交实验分析获得最佳发酵产酶配方与发酵条件，最终摇瓶发酵水平可达5.92U/mL。 | ||
| 搜索关键词： | 低温 乳糖酶 拉恩氏菌 筛选 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种产低温乳糖酶的拉恩氏菌筛选方法，包括以下步骤：(1)初筛：吸取富集后的培养液用倍比稀释法制不同的稀释度移入初筛平板中，涂匀，15℃培养，筛选蓝色菌落，分离纯化，斜面保存。(2)复筛：选取上限温度为40℃不生长的菌株为试验菌株。活化斜面保藏试验菌株，转接发酵培养基于15℃进行摇瓶培养(50mL/250mL)48h。提取粗酶液，测定15℃下水解活力，选取高酶活菌株Rahnella sp.R3为产低温乳糖酶的菌株。
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