[发明专利]生产葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶的方法有效
| 申请号： | 201210141944.1 | 申请日： | 2012-05-02 |
| 公开（公告）号： | CN102719459A | 公开（公告）日： | 2012-10-10 |
| 发明（设计）人： | 张爱联;张泽华;张添元;易国辉 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/56 | 分类号： | C12N15/56;C12N15/75;C12N15/81;C12N1/21;C12N1/19;C12N9/42;C12R1/125;C12R1/84 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 571101 海南省海口市学院*** | 国省代码： | 海南;66 |
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| 摘要： | 本发明公开了生产葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶的方法。属生物技术领域。首先克隆木霉的葡聚糖内切酶基因、葡聚糖外切酶基因和β-葡萄糖苷酶基因；构建含这三种酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌表达载体和毕赤酵母表达载体；将表达载体转化相应的宿主菌；分别筛选高表达葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶的枯草芽孢杆菌重组子和毕赤酵母重组子作为工程菌。发酵枯草芽孢杆菌工程菌和毕赤酵母工程菌生产的重组混合葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶。本发明解决了用天然菌株生产混合葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶中遗留的酶产量低的关键问题，有利于降低其酶产品的价格。 | ||
| 搜索关键词： | 生产 聚糖 内切酶 外切 葡萄 糖苷酶 方法 | ||
【主权项】：
生产葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β‑葡萄糖苷酶的方法。其特征在于：通过分子生物学技术克隆木霉的葡聚糖内切酶基因、葡聚糖外切酶基因和β‑葡萄糖苷酶基因，构建含木霉的葡聚糖内切酶基因表达框架、葡聚糖外切酶基因表达框架和β‑葡萄糖苷酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌表达载体和毕赤酵母表达载体；将枯草芽孢杆菌表达载体转化枯草芽孢杆菌从而获得枯草芽孢杆菌重组子、将毕赤酵母表达载体转化毕赤酵母从而获得毕赤酵母重组子；分别筛选高达以上所述的三种酶的枯草芽孢杆菌重组子和毕赤酵母重组子作为含木霉的葡聚糖内切酶基因表达框架、葡聚糖外切酶基因表达框架和β‑葡萄糖苷酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌工程菌和毕赤酵母工程菌；用含木霉的葡聚糖内切酶基因表达框架、葡聚糖外切酶基因表达框架和β‑葡萄糖苷酶基因表达框架的枯草芽孢杆菌工程菌和毕赤酵母工程菌生产重组混合葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β‑葡萄糖苷酶。
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