[发明专利]发热伴血小板减少综合症布尼亚病毒环SFTSV介导等温扩增快速检测试剂盒及方法有效
申请号: | 201210106183.6 | 申请日: | 2012-04-12 |
公开(公告)号: | CN102618669A | 公开(公告)日: | 2012-08-01 |
发明(设计)人: | 李兵;黄尉初;刘元东;车吉泊;靳晓红 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军济南军区联勤部疾病预防控制中心 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 杨琪 |
地址: | 250014 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种发热伴血小板减少综合症布尼亚病毒环SFTSV介导等温扩增快速检测试剂盒,由以下组分组成:(1)10X扩增反应液:2.5μl;(2)25mmol/l dNTP:2μl;(3)F3/B3外引物:各5pmol;FIP/BIP内引物:各40pmol;LF/LB环引物:各20pmol;(4)Bst DNA聚合酶:1μl;(5)反转录酶:1μl;(6)荧光染料:1μl;(7)ddH2O。使用时,加入待检测者的RNA,扩增后,观察反应体系的颜色变化,并以此判断检测结果。本发明检测试剂盒及检测方法,检测成本低廉、操作方便、检测速度快,实现了高度特异性及与PCR相同的高灵敏度,为发热伴血小板减少综合症的及时诊疗提供科学的依据。 | ||
搜索关键词: | 发热 血小板 减少 综合症 布尼亚 病毒 sftsv 等温 扩增 快速 检测 试剂盒 方法 | ||
【主权项】:
发热伴血小板减少综合症布尼亚病毒环SFTSV介导等温扩增快速检测试剂盒,其特征在于:该试剂盒包括以下组分:(1)10X扩增检测反应液:扩增检测反应液由水、200mmol/L Tris‑HCl、100mmol/L KCl、80mmol/L MgSO4、100mmol/L(NH4)2SO4和8mol/L Betaine组成;(2)25mmol/l dNTP;(3)扩增检测用引物组:为S片段特异性引物组、L片段特异性引物组或M片段特异性引物组,其中,S片段特异性引物组由F3/B3外引物、FIP/BIP内引物和LF/LB环引物组成,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示;L片段特异性引物组由F3/B3外引物、FIP/BIP内引物和LF/LB环引物组成,其核苷酸序列如SEQ ID NO.7~12所示;M片段特异性引物组由F3/B3外引物、FIP/BIP内引物和LF/LB环引物组成,其核苷酸序列如SEQ ID NO.13~18所示;(4)Bst DNA聚合酶:8U/μl;(5)反转录酶:avian myeloblastrosis virus reverse transcriptase 100U/μl;(6)荧光染料:1/1000 SYBR GREEN I或HNB dye;(7)ddH2O。
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