[发明专利]一种检测巯基化合物的荧光探针及其制备方法与使用方法

摘要

本发明公布了一种检测巯基化合物的荧光探针及其制备方法与使用方法，现有技术难以满足生物检测和荧光成像的要求。本发明由两部分组成，其中2,4-二硝基苯磺酰基为识别基团，而丹磺酰氯衍生物为信息报告功能团，当体系内存在巯基时，巯基能与2,4-二硝基苯磺酰基发生特异性反应，使信息报告功能团的荧光发生变化，从而实现对巯基的特异性检测。本发明探针分子合成简便，稳定性好，能够长期保存使用，具有较高的巯基检测灵敏度，具有优秀的选择性，与其它常见干扰分子无作用，具有长的荧光发射波长（>500nm），能够有效地避免来自生物大分子小于500nm背景荧光的干扰，可应用于生物体系的检测。

主权项

1. 一种检测巯基化合物的荧光探针制备方法，其特征在于：该检测生物巯基的荧光探针有两部分组成：2,4-二硝基苯磺酰基为识别基团，丹磺酰氯衍生物为信息报告功能团，其结构如式I；检测生物巯基的荧光探针的制备路线如下：检测巯基化合物的荧光探针的制备方法，包括以下步骤，步骤一，式II的制备：将0.2～0.4 g对苯二酚溶于50 mL 的二氯甲烷中，再加入0.6 mL三乙胺，0℃条件下加入0.6～1.2 g丹磺酰氯，然后在室温下搅拌反应10～15小时，待反应结束后，蒸干溶剂，以硅胶柱进行分离；步骤二，式I的制备：将0.6～1.2 g式II化合物溶于50 mL二氯甲烷中，并加入1.5 mL三乙胺,搅拌5分钟后,向反应体系内滴加溶有0.9～1.8 g 2,4-二硝基苯磺酰氯的二氯甲烷溶液10 mL，待滴加完全后，室温继续搅拌10～15小时，减压除溶剂，粗产品用硅胶柱层析进行分离纯化，以石油醚：乙酸乙酯= 4：1为洗脱剂洗脱，得到探针分子纯品。