[发明专利]一种用于培育转基因植物的培养基有效
申请号: | 201210078381.6 | 申请日: | 2012-03-22 |
公开(公告)号: | CN103320377A | 公开(公告)日: | 2013-09-25 |
发明(设计)人: | 漆小泉;赵素珍 | 申请(专利权)人: | 中国科学院植物研究所 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;C12N5/10;A01H4/00;C12N15/84;A01H5/00 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100093 北京市海淀区香*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于培育转基因植物的培养基。本发明提供的培养基组由愈伤诱导培养基、继代培养基、共培养培养基、筛选培养基和再生培养基组成;本发明的实验证明,本发明提供的转化体系及转化方法,平均每100个二穗短柄草幼胚就能产生约103个阳性转化苗,阳性苗转化率达到103.4%,远远高于传统的和谷类模式植物水稻。水稻阳性苗的最高转化率为47.6%(植物学通报,2008年,25(3),322-331)。短柄草高效的农杆菌转化体系为温带和谷类植物基因功能研究提供了重要的技术手段。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 培育 转基因 植物 培养基 | ||
【主权项】:
一种用于培育转基因短柄草的培养基组,由愈伤诱导培养基、继代培养基、共培养培养基、筛选培养基和再生培养基组成;所述愈伤诱导培养基是在MS基本培养基中添加2,4‑D、麦芽糖、L‑天冬酰胺、肌醇、水解酪蛋白、脯氨酸和盐酸硫胺素,得到愈伤诱导培养基;其中,所述2,4‑D在所述愈伤诱导培养基中的终浓度为2.5mg/L,所述麦芽糖在所述愈伤诱导培养基中的终浓度为30mg/L,所述L‑天冬酰胺在所述愈伤诱导培养基中的终浓度为150mg/L,所述肌醇在所述愈伤诱导培养基中的终浓度为0.2g/L,所述水解酪蛋白在所述愈伤诱导培养基中的终浓度为0.5g/L,所述脯氨酸在所述愈伤诱导培养基中的终浓度为700mg/L,所述盐酸硫胺素在所述愈伤诱导培养基中的终浓度为1.5mg/L;所述继代培养基是在MS基本培养基中添加2,4‑D和6‑BA,得到继代培养基;其中,所述2,4‑D在所述继代培养基中的终浓度为2.5mg/L,所述6‑BA在所述继代培养基中的终浓度为0.01mg/L,所述共培养培养基是在MS基本培养基中添加葡萄糖和乙酰丁香酮,得到共培养培养基;其中,所述葡萄糖在所述共培养培养基中的终浓度为10g/L,所述乙酰丁香酮在所述共培养培养基中的终浓度为200μM,所述筛选培养基是在MS基本培养基中添加巴龙霉素和特美汀,得到筛选培养基;其中,所述巴龙霉素在所述筛选培养基中的终浓度为25mg/L‑50mg/L,所述特美汀在所述筛选培养基中的终浓度为125mg/L‑225mg/L;所述再生培养基是在MS基本培养基中添加细胞激动素,得到再生培养基;其中,所述细胞激动素在所述再生培养基中的终浓度为0.2mg/L。
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