[发明专利]用模拟移动床色谱分离提纯葡萄皮白藜芦醇的方法

摘要

本发明公开了一种用模拟移动床色谱分离提纯葡萄皮白藜芦醇的方法，以提高白藜芦醇产品纯度和收率。该方法包括以下内容：原料选用醇提法得到的葡萄皮浸膏；以甲醇水溶液为流动相，用模拟移动床进行纯化；色谱柱填料及流动相选用反相ODS填料，粒度为25-35um，流动相为甲醇水溶液。分离步骤包括：样液的配制；流动相的配制；浓缩；HPLC法检测。本发明与柱色层法、高效液相色谱法(HPLC)相比，能连续高效的从葡萄皮浸膏中分离提纯出高纯度的白藜芦醇，白藜芦醇产品纯度达到98％，收率达到85％，白藜芦醇的集中度高，节省大量的流动相，并且能实现大规模连续化生产，大大降低生产成本。

主权项

一种用模拟移动床色谱分离提纯葡萄皮白藜芦醇的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：1原料选择：用醇提法得到的葡萄皮浸膏，白藜芦醇质量百分比含量10％；2以甲醇水溶液为流动相，用模拟移动床进行纯化；2.1设备及条件选择采用模拟移动床色谱系统，该系统包括洗脱泵、进样泵、萃取泵、色谱柱、7通阀、9通阀、4通和连接管组成，洗脱泵流量0‑5mL/min，压力0‑10Mpa；进样泵流量0‑5mL/min，压力0‑8Mpa；萃取泵流量0‑5mL/min，压力0‑10Mpa；工作温度25‑30℃，色谱柱为10mm×200mm的半制备柱；2.2色谱柱填料及流动相选择选用反相ODS填料，粒度为25‑35um，流动相为甲醇水溶液；2.3分离步骤2.3.1样液的配制以葡萄皮乙醇浸提膏为原料，其中含质量百分比白藜芦醇10％，用质量百分比70％甲醇水溶液溶解、0.45μm滤膜过滤，滤液浓度为50g/L；2.3.2流动相的配制甲醇∶水＝1∶1(V∶V)2.3.3模拟移动床色谱参数色谱柱分配方式：解吸段1根柱、精制段1根柱、吸附段2根柱；各泵参数：进样泵流速Uf＝0.1mL/min，洗脱泵流速Ud＝1.5mL/min，萃取泵流速Ue＝1.0mL/min，残余液流速Ur＝1.6mL/min；操作温度：25‑30℃；切换时间：切换时间ts＝18.0～19.0min，萃取液E为产品；2.3.4浓缩残余液及萃取液分别用薄膜旋转蒸发器浓缩至无液体，用甲醇洗出后在真空 干燥箱轰干至恒重；3HPLC法检测检测条件：Diamonsil色谱柱，ODS填料，5μm，4.6×150mm，2SPD‑10AVPUV检测器，流动相甲醇∶水＝50∶50(V/V)，流速1.0mL/min，检测波长是308nm，进样量20uL，室温，由白藜芦醇对照品来确定产品中的组分，并由外标法标定白藜芦醇的纯度为98％以上。