[发明专利]一种蘑菇菌种的保藏方法

摘要

本发明公开了一种蘑菇菌种保藏方法，其保藏方法步骤为：（1）培养基配制；（2）加大填料量减少与空气接触面；(3)真空冷冻干燥；（4）置换管塞；（5）包装与温度控制；用保险袋和保险盒双重保护菌种，置于5±1℃恒温冰箱冷藏，使菌种不易失活。本发明提高低温耐冻性、耐负压行及复水成活率等性能，然后制备冷冻管进行保存，确保长入内部的菌丝可长期存活；并通过木粉填充空隙一方面可增加木质类养分，另一方面减慢水分的散失，而且与空气接触面只有试管内径大小，加上特制试管塞，可保持培养基3年失水率小于30%，具有成本低廉、操作简单、稳定可靠，保藏期长、成活率高和适用范围广的优点，值得推广使用。

主权项

一种蘑菇菌种保藏方法，其特征在于，其保藏方法包括如下步骤：（1）培养基配制；其包括小麦提取液20‑30%，木粉30‑40%，酵母提取液1.5‑3%，蔗糖0.8‑2%，乳糖1.2‑2.6%，缓冲剂0.5‑1%,氯化钙0.6‑1%，硫酸镁0.8‑1.5%，琼脂1%‑2%，料水30‑70%，PH6.1‑7.0，制成无菌平皿，待培养基凝固时，在培养基表面铺设一层在培养基表面铺设一层多孔纸；（2）加大填料量减少与空气接触面；待培养基冷却至22‑24℃时，将蘑菇菌种接种至载体上，在22℃无菌培养箱内培养100小时，然后将载体连同菌种一并取下，并按照试管底部大小剪切至相应大小放置在试管中，稍压实，加棉塞，在通过高压蒸汽128℃灭菌40‑50分钟，连容器搬入无菌室；(3)真空冷冻干燥；将步骤（2）中装入菌种的载体试管放入冷冻干燥机，将温速度为每分钟3℃，冷却至‑40℃，恒温预冻2小时，然后开启真空泵，在20分钟内真空度达到22帕后，以每25分钟隔板温度升高5℃，真空度降低6帕，待隔板温度升高25℃，真空降到0.5帕，样品升高为25℃；（4）置换管塞；接种时将用升汞溶液消毒的高密度聚苯乙烯泡塑试管置换棉塞；（5）包装与温度控制；用保险袋和保险盒双重保护菌种，置于5±1℃恒温冰箱冷藏，使菌种不易失活。