[发明专利]一种蘑菇菌种的保藏方法

权利要求书

1.一种蘑菇菌种保藏方法，其特征在于，其保藏方法包括如下步骤：

（1）培养基配制；其包括小麦提取液20-30%，木粉30-40%，酵母提取液1.5-3%，蔗糖0.8-2%，乳糖1.2-2.6%，缓冲剂0.5-1%,氯化钙0.6-1%，硫酸镁0.8-1.5%，琼脂1%-2%，料水30-70%，PH6.1-7.0，制成无菌平皿，待培养基凝固时，在培养基表面铺设一层在培养基表面铺设一层多孔纸；

（2）加大填料量减少与空气接触面；待培养基冷却至22-24℃时，将蘑菇菌种接种至载体上，在22℃无菌培养箱内培养100小时，然后将载体连同菌种一并取下，并按照试管底部大小剪切至相应大小放置在试管中，稍压实，加棉塞，在通过高压蒸汽128℃灭菌40-50分钟，连容器搬入无菌室；

(3)真空冷冻干燥；将步骤（2）中装入菌种的载体试管放入冷冻干燥机，将温速度为每分钟3℃，冷却至-40℃，恒温预冻2小时，然后开启真空泵，在20分钟内真空度达到22帕后，以每25分钟隔板温度升高5℃，真空度降低6帕，待隔板温度升高25℃，真空降到0.5帕，样品升高为25℃；

（4）置换管塞；接种时将用升汞溶液消毒的高密度聚苯乙烯泡塑试管置换棉塞；

（5）包装与温度控制；用保险袋和保险盒双重保护菌种，置于5±1℃恒温冰箱冷藏，使菌种不易失活。

2.根据权利要求1所述的一种蘑菇菌种保藏方法，其特征在于，上述培养基配制的组成配方包括小麦提取液20%，木粉31%，酵母提取液2%，蔗糖0.8%，乳糖2%，缓冲剂0.5%,氯化钙0.7%，硫酸镁1.2%，琼脂1.2%，料水41%，PH为6.8。

3.根据权利要求1所述的一种蘑菇菌种保藏方法，其特征在于，上述培养基配制的组成配方包括小麦提取液25%，木粉30%，酵母提取液1.6%，蔗糖1%，乳糖1.5%，缓冲剂0.8%,氯化钙0.7%，硫酸镁1.3%，琼脂1.9%，料水44%，PH为6.5。

4.根据权利要求1所述的一种蘑菇菌种保藏方法，其特征在于，，上述培养基配制的组成配方包括小麦提取液30%，木粉15%，酵母提取液2.8%，蔗糖1.2%，乳糖2.5%，缓冲剂0.6%,氯化钙0.9%，硫酸镁1%，琼脂1.2%，料水37%，PH为6.7。

5.根据权利要求1至4任意一项所述的一种蘑菇菌种保藏方法，其特征在于，上述缓冲剂为硫酸钙或碳酸钙。

6.根据权利要求1至4任意一项所述的一种蘑菇菌种保藏方法，其特征在于，上述料水比为1:1。