[发明专利]一种高效表达重组角质细胞生长因子-1及其类似物的生产方法无效
| 申请号： | 201210032424.7 | 申请日： | 2012-02-02 |
| 公开（公告）号： | CN103243103A | 公开（公告）日： | 2013-08-14 |
| 发明（设计）人： | 姜潮;李校堃;薛萍;朱小静;潘薛波;王晓杰;田海山 | 申请（专利权）人： | 温州医学院生物与天然药物开发中心有限公司;浙江格鲁斯特生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/866;C12N5/10;C07K14/50;C07K1/22;C07K1/18 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 325035 浙江省温州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及人角质细胞生长因子-1(KGF1)或其类似物的昆虫细胞生产方法，包括设计昆虫细胞表达优化的基因序列，以及用于在昆虫细胞中的表达方法和纯化步骤。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 表达 重组 角质 细胞 生长因子 及其 类似物 生产 方法 | ||
【主权项】：
人KGF1或其类似物的昆虫细胞生产方法，其包括，(1)设计人KGF1和其突变体的昆虫细胞表达优化基因序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1、2或3所示；(2)将步骤(1)获得的优化基因克隆到pFastbac质粒后转座进入穿梭载体；(3)用步骤(2)获得的穿梭载体转染昆虫细胞，收获病毒；(4)用步骤(3)获得的病毒感染昆虫细胞并培养，收获病毒及分析蛋白表达；(5)分别收集步骤(4)培养获得的上清和细胞，上清和/或细胞裂解液过滤；(6)将步骤(5)获得的滤液上样于亲和层析柱，收集洗脱峰；和(7)将步骤(6)获得的洗脱峰上样于阳离子交换层析柱，收集洗脱峰。
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